Л карнитин что это такое и для чего он нужен: что это? для чего он нужен?

Содержание

Л-карнитин для чего он нужен и как его принимать для похудения женщинам и мужчинам

Содержание

L-карнитин – одна из самых популярных добавок для похудения среди мужчин и женщин. Чтобы понять, подходит ли вам данная категория спортивного питания, нужно разобраться, что она из себя представляет.⁠

L-карнитин – природное вещество, которое синтезируется организмом человека из аминокислот лизина и метионина. Те в свою очередь поступают внутрь вместе с белковыми продуктами, будь то животные или растительные белки. Левокарнитин активно задействован процессе жирового и энергетического обмена, что помогло ему обрести популярность у спортсменов-атлетов для разгона метаболизма. В медицинских целях добавку используют по причине того, что синтез организмом замедляется после 40 лет.

Левокарнитин — незаменимое химическое соединение, похожее по своим качествам и структуре на аминокислоту, которое вырабатывается в человеческом организме естественным путем.

Оно помогает нашему телу вырабатывать дополнительную энергию и играет важную роль в движении мышц, нормальном функционировании мозга и работе сердца и сосудистой системы.

L-карнитин – биологически-активная добавка, обычно используемая для стимулирования мышечной энергии и сжигания жира. Он помогает преобразовывать жирные кислоты в топливо, необходимое для выработки мышечной энергии. Этот процесс способствует потере жира и росту мышечной массы. L-карнитин не содержит стимуляторов и идеально подходит для применения вместе со сжигателем жира и другими продуктами для контроля веса и улучшения результатов тренировок.

Для чего нужен L-Карнитин и как он работает?

Единственная и главная функция Л-карнитина – ускорения процесса жиросжигания в процессе физических упражнений. Доказано московскими учеными НИИ «Питания», что дополнительный прием карнитина ускоряет восстановительные процессы в организме после тренировок, стабилизирует обмен глюкозы и инсулина.

Также Л-карнитин способствует повышению выносливости, благодаря ускорению проникновения жирных кислот в клеточные митохондрии организма. Таким образом повышается общий тонус организма, за счет ускоренного окисления жиров и получения из них энергии. В этом и заключается его основное действие.

Когда вы занимаетесь спортом, в теле происходят тысячи биохимических реакций. В частности, ферменты вступают в действие и начинают расщеплять накопленный жир на кислоты и глицерин. Затем они используются в качестве топлива на протяжении всей тренировки.

Польза L-карнитина

Как было упомянуто выше, карнитин обладает целым рядом положительных качеств, почему и пользуется популярностью в фитнес-сообществе. Обобщив которые, мы получим основные свойства карнитина:

Способствует похудению;
Помогает быстрее восстанавливаться после изнурительных тренировок;
Стимулирует рост мышечной ткани;
Повышает выносливость;
Позитивно влияет на сердечно-сосудистую систему, снижая вредный холестерин;
Повышает мозговую деятельность

Вред L-карнитина

Учитывая тот факт, что L-карнитин – вещество, исключительно природного происхождения, следует отметить отсутствие побочных эффектов при приеме добавки. Однако, как и с другими добавками, следует с умом подходить к дозировкам. Ведь чрезмерный прием L-карнитина способен вызвать расстройства ЖКТ.

Противопоказания к карнитину: болезни почек (например, почечная недостаточность), а также мышечные судороги. Также не рекомендуется прием добавки людям с заболеваниями сердечно-сосудистой системы.

Поскольку соединение обладает выраженным жиросжигающим действием, принимать добавки на его основе рекомендуется для снижения веса, набора мышечной массы, увеличения работоспособности.

Для достижения максимальных результатов при спортивных тренировках рекомендуется принимать добавку до начала занятий. В идеальном варианте осуществлять прием данного типа спортивного питания в первой половине дня.

Виды L-карнитина

Классический L-карнитин без каких-либо добавок;
L-карнитин тартат – более активная форма с повышенной биодоступностью. К активному веществу добавляют винную кислоту;
Ацетил L-карнитин. Жиросжигатель + ацетитильная группа. Оказывает ярко выраженное нейростимулирующее действие;
L-карнитин фумарат. Фумаровая кислота, входящая в состав, оказывает положительное влияние на сердечно-сосудистую систему;
L-карнитин пропионил – эфиросодержащая добавка. Производители отмечают, что данная форма укрепляет сердечно-сосудистую систему, помогает в борьбе с хронической усталостью

В зависимости от формы элькарнитина (порошок, жидкий в бутылках и ампулах, таблетировано-капсульный) рассчитывается доза по вышеуказанным нормам. После чего вопросы, типа: «Как правильно пить жидкий карнитин?» или «Как правильно принимать Л-карнитин в таблетках?» не будут иметь смысла.

Как принимать L-Карнитин?

Прием этой добавки с достаточным количеством быстродействующих углеводов может принести большую пользу, поскольку инсулин — гормон, который выделяется при потреблении углеводов, стимулирует транспорт карнитина в скелетные мышцы.

В день общая доза препарата не должна превышать четырех граммов. Рекомендуемые дозы 2-4 грамма в день для оптимизации результатов. Профессиональные спортсмены принимают добавку по 3 грамма трижды в день и 7 перед началом тренировки.

В зависимости от нагрузки среднее суточная дозировка эл карнитина составляет 0.5-4 гр./день. Рекомендуется принимать добавку в несколько подходов, где большое кол-во добавки придется на пред тренировочный промежуток. При занятиях бодибилдингом или пауэрлифтингом, а также активными видами спорта (бег, плавание и т.д.) дозировка спортпита считается по верхнему суточному пределу.

При подготовке к соревнованиям допускается увеличение общей нормы до 10 граммов в сутки. Достаточно принимать добавку ежедневно на протяжении нескольких недель, чтобы увидеть первые результаты, которые наверняка придутся вам по душе.

Коротко о главном

Л-карнитин – одна из главных спортивных добавок для похудения из подкатегории жиросжигателей – липотропик. Оказывает положительное влияние на весь организм человека, повышая его тонус.

Среди видов самым популярным остается классический Л-карнитин, за счет соотношения цена-качество. Однако индивидуальный отклик организма на каждый из видов может быть различным, что дает целое поле для экспериментов.

Принимайте до 2гр Л-карнитина в первой половине дня или до тренировки для снабжения организма достаточным уровнем вещества. Вечером и перед сном употреблять добавку не стоит, рискуете столкнуться с бессонницей. Срок курса: 1-1.5 месяца. После 2 недели перерыв.

Имеет отличную совместимость с такими популярными спортивными добавками как: протеин, гейнер, BCAA, креатин, гуарана, кофеин, таурин, аргинин. Одновременное применение однозначно усилит эффект. Не забудьте про поддержку витаминами, ведь при повышенных нагрузках, повышается и риск получения травм.

P.S. Не принимайте эл карнитин с просроченным сроком давности. Есть риск негативного воздействия на желудок и на всю систему ЖКТ.

Что такое карнитин? Для чего нужен?

Для чего вы тренируетесь? Хотите похудеть, набрать массу, подправить фигуру? Неважно к чему вы стремитесь, потому что рано или поздно вы быстро достигнете пика своих возможностей. И вот тогда вам потребуется помощь! Какая? Читайте ниже.

В современном мире любое достижение цели очень часто имеет обратную сторону — поражается психика и тело.

Вы хорошо знаете своё тело? Скорее всего, нет!
Возможно, вы не знаете, как оно реагирует на стресс, сколько нужно потреблять воды в день, каков предел ваших физических способностей, и пр. Список можно продолжить.
До сих пор многие спортсмены не понимают, что мучительные тренировки требуют огромной питательной поддержки. К счастью, сегодня такой поддержкой можно по праву считать КАРНИТИН!

L-Карнитин — это амино-подобное вещество для тех спортсменов, кто заботится о своём здоровье!

Главная его функция — доставка жиров в те участки тела, где они расщепляются на энергию.

Эту энергию вы получаете немедленно и в этом огромный плюс L-карнитина! Благодаря такому свойству тело получает дополнительную выносливость, фокусировку внимания, и энергетику. А ваши жировые резервы тают, как снег в сауне.
И всё это без стимуляторов и без кофеина! Т.е. ваша нервная система не пострадает, не будет раздражительности, скачков давления и бессонницы!

Карнитин жиросжигатель — на что он способен?

Коррекция фигуры и сжигание жира — ещё не всё, на что способен L-карнитин!

Сотни исследований показали, что L-карнитин:

Улучшает память и умственные способности
Участвует в исцелении ран
Поддерживает сердечнососудистую систему
Способствует здоровью кожи

И это ещё не предел возможностей карнитина, потому что его исследование продолжается.

Какой карнитин выбрать?

Активная форма L-карнитина всегда пишется как «L-Carnitine»
Капсулы, таблетки, жидкость, порошок — все формы карнитина эффективны, нужно только определить для себя «рабочую» дозировку.
Внимательно читайте этикетки продукта: надпись «Manufactured BY» означает чуть лучшее качество, чем у тех продуктов, где указано «Manufactured FOR» (это не значит, что одни работают, а другие — нет, просто возьмите это на заметку)

Как принимать L-карнитин

L-Карнитин усваивается быстро (особенно в виде жидкости), поэтому чаще всего его принимают перед физической активностью.
Таблетированный или капсулированный L-карнитин идеально подойдёт для спортсменов аэробных видов спорта, потому что период усвоения и высвобождения у таблеток и капсул более медленный.
Начните с 500 мг на пустой желудок — это наилучшим образом поможет организму приспособиться к его присутствию. Постепенно увеличивайте дозировку до 1000-1500 мг.

p.s. Приобрести L-карнитин вы можете в разделе КАРНИТИН

L-карнитин, для чего он нужен

L-карнитин, для чего он нужен?

Карнитин – это вещество основной функцией, которого является транспортировка в организме жирных кислот, которые в свою очередь поставляются через клеточные мембраны митохондрий (каждая живая клетка в нашем организме состоит из специализированной структуры – митохондрий, с помощью нее и вырабатывается энергия) непосредственно в систему кровообращения. Другими словами карнитин является отличным жиросжигающим средством, а также данное вещество способствует выводу из организма вредных продуктов и этим позволяет организму с высокой эффективностью вырабатывать энергию.

Вещество L-карнитин (Левокарнитин) было открыто русским ученым В.Г. Гулевичем. Он первым доказал, что L-карнитин является метаболическим соединением в мышечной ткани человека и отнес данное вещество к группе небелково азотистым экстрактивных веществам. Он удтверждал, что данное вещество способствует улучшению обмена веществ, путем ускорения процесса метаболизма, а также то, что L-карнитин трансформирует жир и превращает его в энергию. Недостаток данного вещества в организме может вызвать процесс ожирения, образование жировых бляшек и к сердечно-сосудистым заболеванием.

На данный момент L-карнитин является популярной пищевой добавкой в современном спортивном питании. Его употребляют для того, чтобы улучшить обмен веществ в организме, а также для того, чтобы сжечь отложение жиров. L-карнитин – это заменимая аминокислота, которая по своему составу очень схожа с витаминами группы В.

Для тех, кто решил принимать . L-карнитин с целью достижения максимального жиросжигающего эффекта необходимо помнить, что данное вещество поможет избавиться от не желаемого лишнего веса, только при условии, что прием препарата будет проводится в комплексе с правильно подобранным спортивным тренингом и грамотно составленной диетой. Ну и, конечно же, спортсмен должен правильно составить свой распорядок дня, на сон у него должно уходить не менее 8 часов.

Пищевые специализированные препараты, в состав которых входит L-карнитин часто принимают спортсмены для того, чтобы задерживать белки и углеводы, которые необходимы организму. Принимая спортивное питание с содержанием L-карнитина, спортсмен эффективно заряжается энергией, а также снижает быструю утомляемость. В организме атлета во время спортивной тренировки накапливается молочная кислота, которая может вызывать неприятное чувство боли и дискомфорта.

Данная аминокислота эффективно помогает спортсменам нарастить мышечную массу, так как она ускоряет процесс обмена белков. Еще принимая L-карнитин, спортсмен сможет ускорить процесс восстановления организма после изнурительной физической тренировки.

Препараты с содержанием L-карнитина часто назначают людям, у которых присутствуют:

Заболевания сердечно-сосудистой системы. Так как данное вещество эффективно: снижает уровень холестерина в крови, нормализирует артериальное давление, уменьшает риск возникновения атеросклероза.
Больные СПИДом. Таким больным часто приходится принимать препараты, которые приводят к ослаблению мышц и иммунной системы в целом из-за дефицита аминокислот. L-карнитин предотвращает данные процессы и укрепляет организм.
При почечной недостаточности и при различных заболеваниях, которые могут возникнуть в печени или почках. В таких случаях L-карнитин компенсирует потерю аминокислот.

Как видите L-карнитин – это то вещество, которое является просто жизненно необходимым для поддержания хорошего иммунитета, а также для создания красивого тела без лишних отложений жира.

Рекомендуем купить спортивное питание Киев с бесплатной доставкой до станции метро.

L-карнитин: как он помогает сердцу?

Не секрет, что сердечно-сосудистые заболевания уже десятый год кряду являются самой распространенной причиной смерти в мире. По данным ВОЗ, на их долю приходится 30% всех случаев смерти и 45% случаев смерти от неинфекционных заболеваний. Неутешительно звучат и прогнозы: к 2030 г. количество людей, умерших от сердечно-сосудистых заболеваний, может достигнуть 23,6 млн (ВОЗ, сентябрь 2011). В 80% случаев причиной развития упомянутой патологии служат недостаточная физическая активность, курение и нерациональное питание (GazianoТ.А., 2010). Это значит, что если взять себя в руки, расстаться с вредными привычками, активно заниматься спортом и употреблять сбалансированную пищу, то можно улучшить состояние своей сердечно-сосудистой системы.

Отметим, что рациональное питание играет очень важную роль в поддержании здоровья организма. При этом живой интерес у специалистов в отношении здоровья сердечно-сосудистой системы вызывает L-карнитин, а именно возможность его использования с целью первичной и вторичной профилактики нарушений ее работы. Этот нутриент, синтезируемый из 2 аминокислот (лизина и метионина) и именуемый также витамином Вt, принимает участие в транспортировке длинноцепочных жирных кислот через клеточные мембраны в митохондрии с их последующим β-окислением и образованием аденозинтрифосфата, который необходим для обеспечения организма энергией (Steiber A., 2004). Особенно важно это для работы сердечной мышцы, для которой жирные кислоты являются основным энергетическим субстратом. Однако эти вещества не могут самостоятельно проникнуть сквозь мембраны кардиомиоцитов, и в этом случае на помощь приходит упомянутый выше L-карнитин. А степень важности этой аминокислоты для работы миокарда отражается в его концентрации, которая достигает максимума именно в сердце, в 3 раза превышая ее уровень в скелетных мышцах, в 4 — в печени и 8 — в почках (Peluso G., 1998).

Отметим, что L-карнитин обладает и антиоксидантным свойством, поскольку принимает участие в связывании свободных радикалов и стабилизации клеточных мембран, поэтому он может играть определенную роль в отношении профилактики развития атеросклероза. Как антиоксидант L-карнитин актуален и при оксидативном стрессе, поскольку способствует защите эндотелия сосудов и других тканей от пагубного воздействия супероксидных радикалов (Gómez-Amores L., 2007).

Возвращаясь к проблеме сердечно-сосудистых заболеваний, напомним о результатах исследования, согласно которым добавление L-карнитина в дозе 2 г/сутки к рациону пациентов со стабильной стенокардией напряжения позволило отметить у них улучшение переносимости физических нагрузок, что нашло свое отражение в увеличении продолжительности упражнений и уменьшении времени восстановления показателей ЭКГ (Iyer RN, 2000).

Есть несколько источников L-карнитина. Так, 25% необходимого его количества синтезируется в печени и почках в присутствии витаминов С, В₃ и В₆, а также железа (Rebouche C.J., 1989). Остальные ¾ L-карнитина поступают в организм с мясными, рыбными, молочными продуктами (Flanagan J.L. et al., 2010). Однако в силу различных погрешностей питания из-за соблюдения диеты (в том числе вегетарианской) или отсутствия доступа к некоторым продуктам может возникать недостаток данного вещества, что в свою очередь способно спровоцировать развитие энергетического голода в миокарде и привести к нарушению его функционирования. Поэтому важно вовремя поддержать работу сердечно-сосудистой системы.

По этой причине специалисты швейцарскойLife Science компании «Lonza» создали высокоочищенный L-карнитин, представленный на фармацевтическом рынке под торговой маркой Carnipure. Carnipure^ТМ входит в состав многих продуктов, на упаковке которых находится этот товарный знак. Его можно найти в злаковых батончиках, напитках и в составе комплексных пищевых добавок, которые способствуют восполнению запасов L-карнитина в организме и поддержке работы сердечно-сосудистой системы.

Пресс-служба «Еженедельника АПТЕКА»
(©) Niranjancreatnz | Dreamstime.com \ Dreamstock.ru

Цікава інформація для Вас:

| Статьи KWC-Japan

Для чего нужен L-карнитин, правила приёма внутрь, польза и вред

L-карнитин приобрел большую популярность среди спортсменов и людей, которые борются с лишним весом. Левокарнитин представляет собой известную пищевую добавку, обладающую широким спектром действия.

Так как правильно принимать это вещество и зачем l-карнитин необходим в организме?

Свойства L-карнитина в организме

L-карнитин (от лат. carnes – мясо, плоть) – это природное вещество, которое изначально присутствует в теле каждого человека. Химическое соединение родственно витаминам группы B. Карнитин не относится к «полноценным» витаминам, так как он способен самостоятельно синтезироваться в печени.

Левокарнитин был открыт биохимиками В. С. Гулевичем и Р. П. Кримбергом в начале XX века. Только спустя полстолетия удалось синтезировать это вещество (1960 год), а также выяснить, зачем нужен организму l-карнитин. В это же время была определена главная функция соединения – транспортировка жирных кислот к энергетическим клеточным станциям (митохондриям).

Участвуя в энергетическом обмене, карнитин выполняет сложные функции:

переносит длинно- и короткоцепочечные молекулы в матрикс митохондрии;
доставляет важное соединение ацетил-коэнзим А, которое используется во многих биохимических реакциях;
очищает клетки от промежуточных продуктов окисления.

Благодаря работе молекул карнитина, в организме осуществляется успешный транспорт органических соединений в мембранные структуры. Таким образом, это вещество играет значительную роль в поддержании метаболизма. Вот для чего l-карнитин нужен спортсменам, – он поддерживает нормальный синтез энергетической “валюты” клеток – молекул АТФ (аденозинтрифосфорной кислоты), которая снабжает организм энергией для интенсивных физических нагрузок.
По химическому составу левокарнитин сходен с аминокислотой, но технически он не относится к разряду этих соединений. Он оказывает разнонаправленное действие на организм:

Активное сжигание жира. Будучи транспортным средством, карнитин доставляет жировые молекулы в митохондриальный матрикс, где происходит преобразование жира в энергию.
Влияние на развитие плода. Левокарнитин сопровождает будущего ребенка задолго до его появления на свет. Это вещество входит в состав сперматозоидов, участвующих в оплодотворении яйцеклетки. Вот для чего l-карнитин нужен женщинам: он помогает в формировании здоровой ЦНС (центральной нервной системы) у ребенка.
Прирост физической и умственной энергии. Биоактивное вещество запускает двигательные станции организма, которые вырабатывают энергию. Энергетический потенциал используется для физической и умственной активности, в результате чего улучшается память и устойчивость к стрессам.
Детоксикация. L-карнитин известен антиоксидантными и анаболическими свойствами. Эта способность позволяет ему участвовать в утилизации вредных веществ – шлаков и токсинов, накопившихся при окислении жиров. Это качество L-карнитина нужно спортсменам для быстрого восстановления мышечных структур, для укрепления и роста мышечной ткани, для увеличения силы мышц и уменьшения посттренировочной боли в мышцах.
Оптимизация репродуктивной функции. L-карнитин увеличивает активность сперматозоидов, что важно при лечении мужского бесплодия.
Профилактика болезней зрения. L-карнитин улучшает зрительные функции глаз, а также минимизирует риск появления дистрофии сетчатки на 40%.
Польза для работы сердца. Известно, что l-карнитин нужен женщинам и мужчинам для профилактики сердечных заболеваний. Этот биоактивный компонент понижает уровень «плохого» холестерина, что минимизирует риск образования тромбов. L-карнитин также защищает сердечную мышцу от ишемии и гипоксии.

Показания и противопоказания к применению Л-карнитина

Полезные свойства левокарнитина определяют показания к его применению. Исходя из биоактивных способностей этого соединения, врачи назначают его следующим лицам:

Спортсмены. L-карнитин активно используется в спортивной медицине. Повышение работоспособности во время тренировок и активация липидно-жирового обмена – вот для чего l-карнитин так нужен спортсменам.
Пожилые люди. Распространено применение левокарнитина в поддержании здоровья у пожилых людей. Биоактивное вещество замедляет старение нервных клеток и улучшает память.
Дети и подростки со слабым здоровьем. Карнитин также используется в качестве активатора роста мышечного скелета у недоношенных детей и ослабленных подростков.
Пациенты с заболеваниями сердца и печени. Левокарнитин применяется в терапии пациентов, страдающих сердечно-сосудистыми заболеваниями, а также нарушениями работы печени. Это вещество понижает уровень холестерина в кровяном русле и регенерирует клетки поврежденных органов. Вот для чего l-карнитин необходим женщинам и мужчинам с подобными нарушениями.
Вегетарианцы. Препараты на основе l-карнитина назначаются людям, отказавшимся от употребления пищи животного происхождения. Рекомендовано принимать это вещество для восполнения его дефицита, а также при физическом истощении.
Мужчины, имеющие проблемы с зачатием. Давно доказано, что l-карнитин играет большую роль в мужском репродуктивном здоровье. Дополнительный приём биодобавки положительно влияет на подвижность сперматозоидов.

Активация процессов метаболизма и оздоровление всех жизненных систем – вот зачем l-карнитин назначается пациентам из разных групп. Но универсальная добавка имеет и противопоказания:

цирроз;
эпилепсия;
гипертония;
патологии почек;
сахарный диабет;
заболевания периферических сосудов;
гиперчувствительность к препарату.

Людям с этими заболеваниями нужно проконсультироваться с врачом, прежде чем принимать пищевую добавку.

Формы выпуска

Биоактивное вещество различается по формам выпуска. Левокарнитин производится в виде капсул, порошка и раствора.

Капсулы

Капсула или таблетка с содержанием карнитина снабжена оболочкой, которая растворяется в желудке в течение 15-20 минут после приёма. Так чем l-карнитин, нужный женщинам и мужчинам для здоровья, отличается от препаратов других форм? Средство, представленное в твердом виде, будет лишь чуть дольше усваиваться организмом. Эту особенность стоит учесть при проведении терапевтического курса. Однако капсулы отличаются большим удобством в применении.

Добавить в корзину

Купить в один клик

Комплекс KWC Альфа-липоевая кислота + L-карнитин – один из эффективных препаратов, помогающих в поддержании здоровья. Одна упаковка комплекса с улучшенной формулой содержит 120 капсул, которые оказывают разнонаправленное действие на организм:

укрепление иммунитета;
разглаживание морщин и омоложение кожи;
коррекция фигуры и безопасное снижение веса;
снижение уровня холестерина и сахара в крови;
профилактика развития сердечных заболеваний.

Комплекс из капсул отлично сочетается с другими препаратами из оздоровительной линии KWC.

Жидкий

Как и зачем l-карнитин в жидкой форме применяется в медицинской практике? Спортсмены полюбили этот вид добавки за его эффективность. Особенность этого БАДа состоит в том, что он практически моментально приступает к работе. Ведь жидкий препарат всасывается в стенки кишечника за короткий период. Поэтому не стоит совмещать жидкий левокарнитин с приёмом пищи и напитков. Лучше выждать паузу в 20-30 минут.

Порошок

Биоактивное вещество также выпускается в виде порошкообразного состава. Эта форма считается наиболее экономичной, но самой неудобной. Порошковый карнитин разводят в воде в рекомендуемой пропорции, а затем употребляют внутрь в составе напитка.

Норма приёма в сутки

После выяснения вопроса о том, зачем используется l-карнитин, рассматривается раздел о режиме его применения. Данный биокомпонент изначально присутствует в теле человека – около 16-20 мг карнитина синтезируется в печени при поддержании сбалансированного питания. Но суточная потребность в данном веществе у здорового человека составляет в разы больше – 200-500 мг.

Дефицит биоактивного компонента восполняется с помощью БАДов и специальной пищи. Исходя из энергозатрат конкретного человека, врач назначает личную дозировку l-карнитина. Ориентировочная норма:

для ребенка до 6 лет – от 10 до 100 мг;
для подростков – от 100-300 мг;
для взрослых людей без больших физических нагрузок – от 300 до 900 мг
для людей, занимающихся спортом – от 500 до 2500 мг;
при заболеваниях печени и сердечной мышцы – от 1000 до 1500 мг (строго по предписанию лечащего врача).

Также известно, что l-карнитин, нужный спортсменам для проведения тренировок, стоит употреблять согласно правилам:

таблетированную, жидкую и порошковую форму принимают 3 раза в день;
жидкую форму препарата используют за 40 минут до физических нагрузок;
с помощью порошкового левокарнитина делают спортивные коктейли, которые пьют перед тренировкой;
долгий приём биоактивной добавки вызывает привыкание, поэтому продолжительность терапевтического курса нужно обсуждать с врачом;
левокарнитин не является жиросжигателем, эффект добавки для похудения будет виден только при интенсивных занятиях спортом.

Содержание в продуктах питания

Известно, что l-карнитин нужен женщинам и мужчинам для поддержания нормальной жизнедеятельности. Но печень синтезирует только 10% от суточной нормы, которая необходима человеку для здоровой жизнедеятельности. Повышенную потребность левокарнитина можно обеспечить не только применением БАДов, но и употреблением специальных карнитинсодержащих продуктов.

Карнитин, близкий по своему химическому строению к аминокислотам, в изобилии содержится в мышцах. Поэтому лидером по содержанию данного вещества является мускульное мясо (30-120 мг/100 гр продукта):

баранина;
говядина;
телятина;
печень;
крольчатина;
свинина.

Наименьшее количество биодобавки зафиксировано в растительной пище. Вот зачем l-карнитин рекомендован людям, увлекающимся вегетарианством. В этой группе лидерами по содержанию компонента являются грибы и авокадо (3,6 мг и 2,5 мг на 100 гр).

Левокарнитин также входит в состав морепродуктов, но уже в гораздо меньшем количестве, чем в мясе. От 5 до 15 мг на 100 гр продукта содержится в раках, камбале, щуке и креветочном мясе. Молочные продукты (молоко, сгущенка, козий сыр) также являются источником природного карнитина. Мучные изделия и крупы – эта пищевая категория содержит его до 0,2 мг на 100 г.

У большинства людей редко получается восполнить дефицит l-карнитина с помощью питания, и поэтому БАДы с левокарнитином пользуются такой популярностью. Знающий врач всегда поможет определиться с добавками на основе l-карнитина.

Вывод

Многие люди интересуются, для чего l-карнитин нужен женщинам и мужчинам. Это природное соединение оказывает расширенное действие на организм. L-карнитин выступает в роли универсального регулятора обменных процессов, нейропротектора, гепатопротектора и антиоксиданта.

Дефицит левокарнитина в организме компенсируется приёмом биологически активных добавок, которые выпускаются в жидком, твердом и порошковом виде.

Приём карнитинсодержащих БАДов под наблюдением врача позволяет в значительной мере нормализовать метаболические процессы в организме.

L-карнитин – для чего он нужен? Суточная доза L-карнитина для мужчин

L-карнитин – это естественная аминокислота, то есть вырабатывается в организме человека. Однако она расходуется в большом количестве в нескольких жизненно важных процессах, в частности, при выработке энергии и при мышечных усилиях. Поэтому карнитина «собственного производства» не всегда хватает. В лучшем случае он обеспечивает 30–60 % суточной потребности.

Очень часто L-карнитин используют спортсмены, в том числе и любители. Это понятно, поскольку он улучшает выносливость и ускоряет восстановление мышц после нагрузок. Но есть у этой аминокислоты и еще одна важная сфера применения – повышение шансов на зачатие.

Для чего мужчинам нужен L-карнитин при подготовке к зачатию? Он улучшает качество сперматозоидов, так как требуется для их нормального созревания. Прием L-карнитина способствует увеличению общего числа сперматозоидов, их подвижности, снижает число сперматозоидов с неправильным строением. L-карнитин улучшает качество спермы даже тогда, когда причина ее ухудшения не определена, что говорит о его фундаментальном влиянии на процесс сперматогенеза.

При выборе препарата с L-карнитином нужно ориентироваться на четыре параметра.

Качество L-карнитина

Выбирая комплексы с L-карнитином, стоит учитывать, что эффективность во многом зависит от качества сырья.

Недорогой L-карнитин, как правило, поставляется из стран, где нет современных технологий получения сложных органических веществ. Кроме того, в таких случаях нельзя гарантировать, что на производстве проводился тщательный контроль чистоты сырья.

Ответственные производители работают только с качественным сырьем. Например, в состав препарата Сперотон (подробнее о продукте можно узнать здесь) включен L-карнитин бренда Carnipure, произведенный компанией Lonza (Швейцария). Безопасность бренда Carnipure подтверждена Европейским управлением по контролю качества продуктов питания.

Содержание L-карнитина в суточной дозе

Для повышения фертильности мужчинам нужен L-карнитин в дозировке, которая в несколько раз превышает норму (дневная норма – 300 мг). Прием в меньших количествах едва ли существенно повлияет на качество спермы, так как организм «заберет» L-карнитин для других целей.

Поэтому при выборе препарата необходимо внимательно изучить, сколько чистого вещества в нем содержится. Нередко производители, которые вводят в свои комплексы недостаточное количество L-карнитина, стремятся замаскировать этот факт, указывая на упаковке количество не самого вещества, а используемого сырья.

Например, на упаковке вы можете прочитать, что препарат содержит 1 грамм L-карнитина фумарата. Это форма L-карнитина, в состав которой входит не только чистое вещество, но и фумаровая кислота. Когда вы принимаете такой комплекс, в организм попадает только 450 мг карнитина. Если на упаковке написано, что в препарате содержится 1 грамм L-карнитина тартрата, то по факту чистого вещества в таком комплексе – всего 340 мг.

В препарате Сперотон указано содержание именно L-карнитина: в 1 саше содержится 750 мг этой аминокислоты, то есть 250 % от суточной потребности.

Длительность приема

Образование и созревание сперматозоидов происходят постоянно. Полный цикл созревания сперматозоидов в среднем длится 72 дня. На протяжении всего этого времени будущим сперматозоидам требуется L-карнитин. Поэтому недостаточно принимать его пару раз в неделю или даже на протяжении нескольких недель – фертильность не улучшится.

Для повышения качества спермы L-карнитин следует принимать каждый день в течение 3–6 месяцев.

Стоит отметить, что сам L-карнитин обладает на самым приятным вкусом, как и большинство аминокислот. Поэтому можно выбрать комплекс, который принимают всего раз в день, – например, Сперотон. Кстати, у него мягкий цитрусовый вкус, поэтому ежедневный прием препарата не доставит дискомфорта.

Цена препарата

В аптеках можно найти препараты с L-карнитином по разной цене. Однако перед покупкой посмотрите на содержание карнитина и оцените, на сколько дней хватит упаковки при условии, что в сутки нужно 750 мг (250 % от нормы). А после этого посчитайте, сколько упаковок потребуется на 3-месячный курс. Нередко «экономичным» такой препарат кажется лишь на первый взгляд.

Если же препарат имеет высокую цену, оцените свои финансовые возможности, сможете ли вы покупать его на протяжении как минимум трех месяцев.

Сперотон отличает оптимальное соотношение цены и качества. Одной упаковки хватит на месяц. То есть на весь курс вам понадобится всего 3 упаковки препарата.

НЕ ЯВЛЯЕТСЯ РЕКЛАМОЙ. МАТЕРИАЛ ПОДГОТОВЛЕН ПРИ УЧАСТИИ ЭКСПЕРТОВ.

Что такое ацетил-L-карнитин и как его принимать?

Отказ от ответсвенности

Обращаем ваше внимание, что вся информация, размещённая на сайте Prowellness предоставлена исключительно в ознакомительных целях и не является персональной программой, прямой рекомендацией к действию или врачебными советами. Не используйте данные материалы для диагностики, лечения или проведения любых медицинских манипуляций. Перед применением любой методики или употреблением любого продукта проконсультируйтесь с врачом. Данный сайт не является специализированным медицинским порталом и не заменяет профессиональной консультации специалиста. Владелец Сайта не несет никакой ответственности ни перед какой стороной, понесший косвенный или прямой ущерб в результате неправильного использования материалов, размещенных на данном ресурсе.

Что такое ацетил-L-карнитин и как его принимать?

Сегодня существует много полезных лекарственных добавок, одной из которых является ацетил-L-карнитин. В каких случаях люди прибегают к ее применению?

Ацетил-L-карнитин представляет из себя аминокислоту. Она вырабатывается в организме человека почками, дает ему энергию, обладает антиоксидантными свойствами и помогает в борьбе со свободными радикалами.

Для чего нужно это вещество?

Ацетил-L-карнитин выполняет в организме ряд функций:

Защищает головной мозг, улучшает качество когнитивных процессов, делает ум более ясным и работоспособным.
Повышает физическую работоспособность человека.
Выводит из организма токсины, свободные радикалы, другие вредные вещества.
Выводит разрушающие жировые клетки, что снижает риск возникновения болезней Альцгеймера и Паркинсона.
Позволяет лучше запоминать информацию, развивает внимание, помогает выделять нужное в большом информационном потоке. Помогает при нарушениях памяти.
Преобразует жировую ткань в энергию, но не сжигает ее. Помогает человеку похудеть и сбросить лишний вес, если он занимается спортивными тренировками.
Увеличивает скорость протекания обменных реакций и процессов.
Укрепляет кровеносные сосуды.
Поддерживает работу нервной системы.
Снижает утомляемость, сонливость, апатию.
Помогает организму быстрее восстановиться после спортивных тренировок.
Повышает иммунитет.
Защищает человека от старения на клеточном уровне.
Улучшает силовые показатели во время тренировок.

В каких случаях назначают прием препарата?

Ацетил-L-карнитин назначают для приема в следующих случаях:

Обсессивно-компульсивные расстройства.
Нарушения памяти, частичная или полная ее потеря.
Проблемы с репродуктивной системой у мужчин, в том числе бесплодие.
Катаракта или помутнение хрусталика.
Плохое кровоснабжение отдельных участков головного мозга.
Хронический алкоголизм.
Период восстановления после инсульта.
Частые тревожные расстройства.
Злоупотребление курением.
Период восстановления после ишемического поражения головного мозга.

Формы выпуска лекарства

Ацетил-L-карнитин выпускается в разных формах:

Капсулы. Начинают действовать только в кишечнике, не раздражают стенки желудка. Удобны в применении.
Таблетки. Подходят тем, кто постоянно в движении, ведет активный образ жизни, обладает способностью к быстрому действию.
Раствор. Начинает действовать быстрее всего. Оказывает раздражающий эффект на стенки желудка, поэтому не подходят людям с заболеваниями этого органа.
Порошок. Расходуется очень экономично, оснащен специальной мерной ложкой.

Внимание! Порошок L-карнитина нужно разбавлять в большом количестве жидкости (не менее 500 мл) и выпивать за один раз. Раствор нельзя готовить впрок, потому что он теряет свои полезные свойства.

Побочные эффекты

Прием L-карнитина может сопровождаться побочными эффектами:

Расстройство желудка.
Головные боли.
Повышение артериального давления.
Понижение уровня сахара в крови.
Расстройства нервной системы.
Нарушения сна.
Тошнота, рвота.
Повышенная возбудимость, вспышки агрессии.

Противопоказания к применению

Жёстких противопоказаний у препарата нет, но в следующих случаях важно консультироваться со специалистом:

Хронически повышенное давление.
Регулярные расстройства сна.
Гепатит С.
Цирроз печени.

Внимание! Ацетил-L-карнитин – это средство, которое популярно в спортивной индустрии и среди обычных людей. Добавка хорошо переносится организмом, быстро усваивается и практически не имеет противопоказаний к применению.

Отказ от ответсвенности

Карнитин (L-карнитин) Информация | Гора Синай

Benvenga S, Ruggieri RM, Russo A, Lapa D, Campenni A, Trimarchi F. Полезность L-карнитина, природного периферического антагониста действия гормонов щитовидной железы, при ятрогенном гипертиреозе: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое исследование . Дж. Клин Эндокринол Метаб . 2001; 86 (8): 3579-3594.

Берни А., Мешини Р., Филиппи С., Палитти Ф, Де Амицис А., Чесса Л. L-карнитин повышает устойчивость к окислительному стрессу за счет уменьшения повреждения ДНК в клетках телеангиэктазии Атаксии. Mutat Res . 2008; 650 (2): 165-74.

Бьяджиотти Дж., Каваллини Дж. Ацетил-L-карнитин против тамоксифена в пероральной терапии болезни Пейрони: предварительный отчет. БЖУ Инт . 2001; 88 (1): 63-67.

Carrero JJ, Гримбл РФ. Влияет ли питание на заболевание периферических сосудов? Br J Nutr . 2006 Февраль; 95 (2): 217-29. Рассмотрение.

Каваллини Г., Моденини Ф., Витали Г. и др. Ацетил-L-карнитин плюс пропионил-L-карнитин улучшают эффективность силденафила при лечении эректильной дисфункции после двусторонней нервосберегающей радикальной позадилонной простатэктомии. Урология . 2005; 66: 1080-1085.

Круциани Р.А., Дворкин Э., Гомель П., Маламуд С., Каллини Б., Лапин Дж., Портеной Р.К., Эстебан-Круциани Н. Безопасность, переносимость и исходы симптомов, связанных с добавлением L-карнитина у пациентов с онкологическими заболеваниями, усталостью и дефицитом карнитина : исследование фазы I / II. J Устранение болевых симптомов . 2006 декабрь; 32 (6): 551-9.

Custer J, Rau R. Johns Hopkins: The Harriet Lane Handbook . 18 изд. Филадельфия, Пенсильвания; Эльзевьер Мосби; 2008 г.

Дайк Диджей. Потребление пищевых жиров, пищевые добавки и потеря веса. Можно использовать Physiol . 2000; 25 (6): 495-523.

Fugh-Berman A. Травы и пищевые добавки в профилактике и лечении сердечно-сосудистых заболеваний. Пред. Кардиология . 2000; 3: 24-32.

Головка КА. Периферическая невропатия: патогенетические механизмы и альтернативные методы лечения. Альтернативная медицина Ред. . 2006 декабрь; 11 (4): 294-329. Рассмотрение.

Hiatt WR, Regensteiner JG, Creager MA, Hirsch AT, Cooke JP, Olin JW и др.Пропионил-L-карнитин улучшает работоспособность и функциональный статус у пациентов с хромотой. Ам Дж. Мед . 2001; 110 (8): 616-622.

Линч К.Е., Фельдман Х.И., Берлин Я.А., Флори Дж., Роуэн К.Г., Брунелли С.М. Влияние L-карнитина на гипотензию, связанную с диализом, и мышечные спазмы: метаанализ. Am J Kidney Dis . 2008; 52 (5): 962-71.

Malaguarnera M, Cammalleri L, Gargante MP, Vacante M, Colonna V, Motta M. Лечение L-карнитином снижает тяжесть физической и умственной усталости и увеличивает когнитивные функции у центурийцев: рандомизированное и контролируемое клиническое испытание. Ам Дж. Клин Нутр . 2007; 86 (6): 1738-44.

Миягава Т., Кавамура Х., Обучи М. и др. Эффекты перорального введения L-карнитина у пациентов с нарколепсией: рандомизированное, двойное слепое, перекрестное и плацебо-контролируемое исследование. PLoS One . 2013; 8 (1): e53707.

Парк М. Детская кардиология для практикующих . 5-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Эльзевьер Мосби; 2008.

Петегрю Дж. У., Левин Дж., МакКлюр Р. Дж.. Физико-химические, метаболические и терапевтические свойства ацетил-L-карнитина: актуальность для механизма его действия при болезни Альцгеймера и гериатрической депрессии. Мол Психиатрия . 2000; 5: 616-632.

Rathod R, Baig MS, Khandelwal PN, Kulkarni SG, Gade PR, Siddiqui S. Результаты одного слепого рандомизированного плацебо-контролируемого клинического исследования по изучению влияния внутривенного введения L-карнитина на качество жизни, связанное со здоровьем у индийских пациентов, находящихся на поддерживающем гемодиализе. Индийский доктор медицинских наук . Апрель 2006 г .; 60 (4): 143-53.

Синклер С. Мужское бесплодие: соображения питания и окружающей среды. Альтернативная медицина Ред. .2000; 5 (1): 28-38.

Виллани Р.Г., Ганнон Дж., Селф М, Рич, Пенсильвания. Прием добавок L-карнитина в сочетании с аэробными тренировками не способствует снижению веса у женщин с умеренным ожирением. Int J Sport Nutr Exerc Metab . 2000; 10: 199-207.

Volek J, et al. Влияние добавок карнитина на расширение, опосредованное потоком, и воспалительные реакции сосудов на пищу с высоким содержанием жиров у здоровых молодых людей. Ам Дж. Кардиол . 2008; 102 (10).

Werbach MR. Стратегии питания для лечения синдрома хронической усталости. Альтернативная медицина Ред. . 2000; 5 (2): 93-108.

Витте К.К., Кларк А.Л. Микроэлементы и их добавки при хронической сердечной недостаточности. Обновление за пределами теоретических перспектив. Heart Fail Ред. . Март 2006 г .; 11 (1): 65-74. Рассмотрение.

Витте К.К., Кларк А.Л., Клеланд JG. Хроническая сердечная недостаточность и микроэлементы. Джам Колл Кардиол . 2001; 37 (7): 1765-1774.

Xue YZ, Wang LX, Liu HZ, Qi XW, Wang XH, Ren HZ. L-карнитин в качестве дополнительной терапии к чрескожному коронарному вмешательству при инфаркте миокарда без подъема сегмента ST. Кардиоваск Лекарства Ther . 2007; 21 (6): 445-8.

Потенциальная терапевтическая роль L-карнитина в окислительном стрессе скелетных мышц и состояниях атрофии

Нацеливание нутрицевтиков на повреждение скелетных мышц является новой областью исследований, обусловленной необходимостью новых методов лечения ряда заболеваний, связанных с мышцами. L-карнитин (CARN) является важным питательным веществом и играет ключевую роль в митохондриальном окислении β и в регуляции системы убиквитин-протеасома.Как пищевая добавка для улучшения спортивных результатов, CARN был изучен на предмет его способности усиливать β -окисление. Однако влияние CARN на миогенез, митохондриальную активность и процесс гипертрофии полностью не выяснено. Это исследование in vitro направлено на изучение роли CARN в ремоделировании скелетных мышц, процессе дифференцировки и формировании мышечных трубок. Мы проанализировали дифференцировку мышц и морфологические особенности миобластов C2C12, подвергшихся воздействию 5 мМ CARN. Наши результаты показали, что CARN способен ускорять образование миотрубок C2C12 и вызывать морфологические изменения, характеризующие начало процесса гипертрофии.Кроме того, CARN улучшает активацию AKT и нижестоящие клеточные сигнальные пути, участвующие в предотвращении процесса атрофии скелетных мышц. Кроме того, CARN положительно регулирует пути, участвующие в защите от окислительного стресса. В этой работе мы представляем интересный новый механизм потенциального терапевтического использования CARN для лечения патологических состояний, характеризующихся морфологическими и функциональными нарушениями скелетных мышц, производством окислительного стресса и процессом атрофии при старении.

1.Введение

Роль многих питательных веществ в поддержании хорошего здоровья и продлении жизни человека была четко продемонстрирована за последние три десятилетия. В частности, было показано, что растительная пища, продукты животного происхождения и липиды обладают защитным действием против нескольких хронических патологий, таких как возрастные заболевания, включая сердечно-сосудистые [1], нейродегенеративные [2] и воспалительные заболевания [3], диабет [ 4] и миопатии [5]. При этих патологиях критической мишенью являются скелетные мышцы.

Ухудшение структуры и функции скелетных мышц приводит к клинически значимым жалобам, включая прогрессирующую потерю силы, утомляемость, миалгию и судороги. Был достигнут значительный прогресс в понимании молекулярных механизмов, лежащих в основе миопатий мышц. Однако лечение мышечных заболеваний в основном ориентировано на симптомы и включает физиотерапию и упражнения, но в настоящее время нет конкретных фармакологических вмешательств [5, 6].

Учитывая отсутствие методов лечения саркопении и атрофии мышц, идея о том, что пищевые добавки могут иметь положительный эффект при лечении повреждений мышц, вызывает новый интерес.Выводы о том, насколько полезны пищевые добавки для лечения миопатии, осложняются отсутствием однозначных результатов и недостатками в выборе добавок. Исходя из физиологической роли в биохимии и биоэнергетике мышц, неудивительно, что роль карнитина интенсивно изучается.

Карнитин (CARN) — производная аминокислота, играющая важную роль в клеточном энергетическом метаболизме благодаря ацилированию ее β -гидроксильной группы и транспорту длинноцепочечных жирных кислот в матрикс митохондрий [7], где они подвергаются β -окислению.

CARN может поставляться с диетой, особенно с продуктами животного происхождения. Скелетная мышца является наиболее важным хранилищем CARN (95% всех запасов тела), и ее доступность имеет решающее значение для физиологической биоэнергетики этой ткани. Дефицит CARN сильно влияет на функцию скелетных мышц, что обнаруживается при наличии первичных и вторичных дефицитов [8].

В соответствии с ролью CARN в скелетных мышцах, большое количество исследований было направлено на изучение влияния добавок CARN на работоспособность [9], особенно на улучшение и ускорение восстановления после мышечных травм, вызванных физической нагрузкой [7].Было обнаружено, что дополнительный CARN эффективен для ослабления признаков повреждения ткани, вызванного удлинением или интенсивными сокращениями, также в саркопенической мышце [10]. В частности, данные исследований на животных и клинических исследований показали, что лечение CARN положительно влияет на многие различные механизмы, участвующие в патологической потере скелетных мышц [11].

Наблюдаемые преимущества CARN в предотвращении мышечных травм, вызванных нагрузкой, были приписаны его роли как антиоксиданта [12].В скелетных мышцах химически активные формы кислорода (АФК) и азота физиологически синтезируются на низких уровнях и необходимы для нормального производства силы. Когда продукция АФК превышает антиоксидантную способность ткани, окислительный стресс активирует патофизиологические сигналы, ведущие к протеолизу и апоптозу в миофибриллах [13]. Эта последовательность событий считается основной причиной повреждения сарколеммы и причиной снижения мышечной силы, что способствует утомлению [14].

Однако влияние CARN на миогенез, формирование мышечных трубок, атрофию мышц и регенерацию мышц еще полностью не выяснено.

Цель этого исследования — выяснить влияние CARN на миогенез, чтобы предложить новый нутрицевтический подход к лечению мышечных травм и процессов мышечной атрофии.

2. Материалы и методы

2.1. Материалы

Миобластические клетки мыши C2C12 были приобретены из Европейской коллекции культур клеток животных (ECACC). Реагенты были приобретены у Sigma Chemical Co. (Сент-Луис, Миссури, США). Первичные антитела против AKT (C-20), калнексина (H-70), CAMKII (M-176), ERK1 (K-23), ERK2 (C-14), GAPDH (FL-335), рецептора IGF-1 β (C-20), Myf5 (c-20), MyHC (H-300), MyoD (C-20), миогенин (D-10), pERK1 / 2 (E-4), анти-p53 (FL -393), p70S6 (C-18), pp70S6 (sc-7984), SOD2 (FL-222), вторичные антитела, конъюгированные с пероксидазой, для вестерн-блоттинга и антитела, конъюгированные с родамином, для иммунофлуоресцентного анализа были приобретены у Santa Cruz Biotechnology (Санта-Крус). Круз, Калифорния, США).Первичные антитела фосфо-AKT (Ser473) (D9E) XP и фосфо-AMPK альфа (Thr172) (40H9) были приобретены в компании Cell Signaling Technology (Данверс, Массачусетс, США). Антитело против фаллоидина (Alexa Fluor 488 Phalloidin, молекулярные зонды-Invitrogen) было приобретено Life Technologies (Карлсбад, Калифорния, США).

2.2. Культура клеток

Клетки C2C12 поддерживали при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO ), 1% пенициллина, стрептомицина и 1% L-глутамина до 70% слияния.Дифференцировку клеток инициировали помещением 70% конфлюэнтных культур клеток в среду для дифференцировки (DM), содержащую DMEM с добавлением 1% HS (лошадиной сыворотки), антибиотиков и 1% L-глутамина. В нашей модели дифференцировки in vitro ранние мышечные трубки появлялись через 24–48 часов (ч) после сывороточного голодания, а формирование неомиотрубок завершалось через 72 часа [15].

2.3. Экспериментальные процедуры

Пролиферирующие клетки, дифференцирующиеся миоциты и неомиотрубки обрабатывали 5 мМ CARN, биоактивным L-изомером карнитина.Эта доза была выбрана после предварительного анализа зависимости реакции от дозы, чтобы установить эффективную дозу для лечения (данные не показаны). В контрольные клетки CARN не добавляли в среду. На рисунке 1 поясняется план экспериментального исследования на каждой фазе протокола с указанием процента слияния клеток, времени начала и продолжительности лечения.

2.4. Кривая роста и тест жизнеспособности клеток

Чтобы изучить роль CARN в пролиферации миобластов C2C12, мы выполнили анализ кривой роста, как описано в [16].Вкратце, миобласты C2C12 высевали в чашки для культивирования 60 мм × 15 мм при 40% конфлюэнтности и выращивали в GM с или без CARN и в DM. Среду меняли каждые 24 часа, и эксперимент длился до тех пор, пока контрольные клетки не достигли 70% слияния (3 дня). Ежедневно клетки обрабатывали трипсином, окрашивали трипановым синим и подсчитывали с помощью гемоцитометра. Средние значения для каждого дня были использованы для построения кривой роста. Жизнеспособность клеток рассчитывали путем деления количества неокрашенных жизнеспособных клеток на общее количество клеток.Кроме того, морфологические изменения ежедневно исследовали с помощью фазово-контрастной микроскопии.

2,5. Вестерн-блоттинг

Белковые экстракты, выполненные, как описано в другом месте [17], были получены из культур клеток с использованием следующего лизирующего буфера, содержащего: 50 мМ Трис / HCl, pH 7,4, 150 мМ NaCl, 1% Тритон X-100, 1 мМ ортованадат натрия (Na ₃ VO ₄), 1 мМ ЭДТА, 1 мМ ФМСФ, 1 мг / мл апротинина, 1 мг / мл лейпептина и 1 мг / мл пепстатина.

Аликвоты из 30 мкл г белков супернатанта, количественно определенные с использованием метода Брэдфорда, разделяли на геле SDS-PAGE и переносили на нитроцеллюлозную мембрану (Protran, Whatman Schleicher & Schuell).Мембраны инкубировали со специфическими первичными антителами, а затем с конъюгированными с HRP антивидовыми вторичными антителами. Для подтверждения равной нагрузки белка на образец использовали антитела против калнексина или анти-GAPDH. Количественное измерение интенсивности иммунореактивных полос, визуализированное методом усиленной хемилюминесценции (Amersham Pharmacia Biotech, Пискатауэй, Нью-Джерси, США), проводили денситометрическим анализом с использованием программного обеспечения Scion Image (Scion Corporation, Фредерик, Мэриленд, США).Затем данные были преобразованы в кратные изменения (FC) контролей [18].

2.6. Иммунофлуоресцентный анализ

Клетки C2C12, фиксированные и проницаемые, как описано в [19], блокировали PBS, содержащим 1% бычьего сывороточного альбумина. Затем предметные стекла или клетки иммуноокрашивали конъюгированными с родамином специфическими антителами и выявляли ядра с помощью окрашивания DAPI. Слайды были смонтированы с помощью Moviol. Клетки наблюдали с помощью микроскопии Nikon Eclipse 50I, а изображения получали с помощью Nis-Elements D 4.00 (Nikon Instruments Europe BV, Нидерланды). Данные отображались и анализировались с помощью Adobe Photoshop CS4. Живые клетки C2C12 исследовали, и изображения получали с помощью фазово-контрастной микроскопии с использованием того же микроскопа и цифровой системы, описанных выше.

2.7. Статистический анализ

Все эксперименты проводили трижды. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение. Статистическую значимость оценивали с помощью -тестов или тестов Anova, в зависимости от ситуации. Результаты считались значимыми, когда.

3. Результаты

3.1. Действие CARN во время пролиферации миобластов и фиксации миоцитов

Первоначально мы стремились определить влияние добавок экзогенного CARN на пролиферацию клеток миобластов (рис. 2). Клетки культивировали в трех разных средах в течение трех дней: GM, GM с добавлением 5 мМ CARN и DM. Действие CARN на способность к пролиферации C2C12 изучали, оценивая тест на жизнеспособность и тенденцию кривой роста. DM оказывает ингибирующее действие на пролиферативную способность C2C12, в отличие от эффекта наложения CARN и GM (рис. 2 (b)).В исследованных условиях обработка CARN не оказывала отрицательного воздействия на жизнеспособность клеток (рис. 2 (а)). Этот результат был подтвержден нестимулированной экспрессией р53 через 3 дня приема CARN (рис. 2 (b)).

Кроме того, в то время как клетки, обработанные GM и CARN, сохранили свои морфологические характеристики при слиянии, клетки DM показали морфологию, более похожую на поляризованные клетки (рис. 2 (c)).

Поскольку миогенная дифференцировка происходит через необратимую остановку клеточного цикла миобластов [20], эти данные предполагают, что CARN еще не может на этой стадии поддерживать первую стадию процесса дифференцировки.

Дифференцировка скелетных мышц регулируется жесткой регуляцией как активности, так и экспрессии ряда факторов транскрипции, особенно членов семейства MRF (MyoD, Myf5, Myogenin и Myf6) [21]. Среди них MyoD и Myf5 тесно связаны с процессом преданности и ранней миогенной дифференцировкой. Обработка миобластов C2C12 с помощью CARN значительно увеличивала уровень белка MyoD аналогично DM (FC: CARN, FC: DM; по сравнению с GM через 24 часа; по сравнению с GM, CARN, тест DM Anova, рис. 2 (b)).

В качестве дополнительного подхода мы проанализировали морфологию миобластов CARN с помощью иммунофлуоресцентного анализа, проведенного с использованием антител против Myf5 и MyoD. Примечательно, что данные иммунофлуоресценции миобластов CARN и DM были наложены друг на друга (рисунки 3 (a) и 3 (b)). Стимуляция CARN вызвала важные изменения морфологии клеток по отношению к GM. В частности, через 48 часов миобласты утратили округлую форму, характерную для ГМ-клеток, и приобрели удлиненную морфологию. Это наблюдение дополнительно подтверждается иммунофлуоресцентным анализом фаллоидина (рис. 3 (c)).

Вместе эти результаты предполагают, что CARN, хотя и не останавливает клеточный цикл, может усиливать экспрессию MRF и затем способствовать фиксации миобластов во время фазы пролиферации.

3.2. Действие CARN во время дифференцировки миобластов: усиление образования миотрубок

Мы исследовали действие CARN во время различных фаз дифференцировки мышц. Чтобы вызвать дифференцировку, миобласты C2C12 поддерживались в GM до ~ 70% конфлюэнтности (время 0), а затем сдвигались в DM или DM с добавлением 5 мМ CARN.Дифференцирующие клетки C2C12 наблюдались через 24, 48 и 72 часа (рис. 1). Чтобы проанализировать возможное влияние CARN на прогрессирование миогенеза, с помощью вестерн-блоттинга определяли уровни белков мышечных маркеров миогенина и MyHC. Как показано на рисунке 4 (a), количество миогенина и MyHC увеличивалось при наличии CARN (DM по сравнению с тестом CARN Anova, в частности FC миогенин 48 часов: DM, CARN; миогенин 72 часа: DM, CARN; FC MyHC 24 часа : DM, CARN,; MyHC 48 часов: DM, CARN,; MyHC 72 часа: DM, CARN,), что указывает на то, что CARN может способствовать образованию мышечных трубок.Более того, мы исследовали, может ли CARN изменять морфологические особенности клеток C2C12 после 24 часов дифференцировки, когда миобласты начинают сливаться в новые мышечные трубки. Иммунофлуоресцентный анализ показал, что количество мышечных трубок в группе C2C12, стимулированной CARN, выше, чем в контроле, подтверждая, что CARN способен усиливать образование мышечных трубок (рис. 4 (b)). В конце процесса дифференцировки светлопольная микроскопия показала, что миотрубки CARN имеют увеличенный диаметр и длину по сравнению с контрольными клетками (рис. 4 (c)).

3.3. Действие CARN во время дифференцировки миобластов: активация сигнального пути

Мы исследовали, участвует ли CARN в дифференцировке скелета, анализируя основные сигнальные пути, участвующие в этом процессе: IGF-1 / AKT / p70S6 и киназа, регулируемая внеклеточными сигналами 1/2 (ERK) . Скелетная мышца — это ткань, очень чувствительная к IGF-1 / AKT / p70S6. Было показано, что IGF-1 способен вызывать гипертрофию через аутокринные или паракринные механизмы [22, 23]. Действие AKT было связано с развитием, регенерацией и гипертрофией скелетных мышц несколькими путями, которые приводят к стимуляции синтеза белка, ингибированию атрофии и предотвращению гибели клеток [24].Мишенью AKT является p70S6K, позитивный регулятор трансляции белков [25]. ERK могут активироваться различными факторами роста / митогенами. Было показано, что активация ERK имеет решающее значение для индуцированной фактором роста пролиферации миобластов, слияния и, следовательно, дифференцировки миобластов [26]. Как показано на Фигуре 5 (а), CARN значительно увеличивал количество рецептора IGF-1 (DM по сравнению с тестом CARN Anova, в частности, 24 часа: DM, CARN; 48 часов: DM, CARN; 72 часа: DM, CARN. ,) и промотированного AKT (тест Anova, в частности, 24 часа: DM, CARN,; 48 часов: DM, CARN,; 72 часа: DM, CARN,) и фосфорилирования киназы p70S6 (24 часа: DM, CARN,; 48 часов : DM, CARN,).Напротив, CARN не оказал никакого влияния на активацию ERK (рис. 5 (b)). Эти результаты демонстрируют, что CARN усиливает миогенную дифференцировку, воздействуя на путь IGF-1 / AKT / p70S6.

3.4. Действие CARN во время дифференцировки миобластов: антиоксидантное действие
SOD2 является критически важной антиоксидантной защитой митохондрий от супероксида, продуцируемого дыханием [27]. Как показано на фиг. 6 (а), 5 мМ CARN увеличивают уровень белка SOD2 во время ранней фазы дифференцировки (тест Anova, в частности, 24 ч: DM, CARN,).Кроме того, признано, что многофункциональная Ca ²⁺ и кальмодулин-зависимая протеинкиназа II (CaMKII) играют решающую роль для нормальной функции митохондрий и, в частности, в антиоксидантном метаболизме [28]. Результаты иммунофлуоресцентного окрашивания (рисунки 6 (b) и 6 (c)) показали, что экспрессия CAMKII в неомиотрубках, стимулированных CARN, была выше, чем в контрольной группе (24–48 часов), что позволяет предположить, что CARN может улучшать не только образование мышечных трубок, но и оказывать антиоксидантное действие. митохондриальные пути.
3.5. Действие CARN на новообразованные миотрубки
Для изучения действия CARN на миотрубки C2C12 новообразованные миотрубки (после 72 часов дифференцировки) стимулировали 5 мМ CARN в течение 24 часов. Вестерн-блоттинг подтвердил доказательства, наблюдаемые в фазе дифференцировки: CARN увеличивает содержание белка MyHC (тест Anova, в частности, DM96h, CARN, по сравнению с DM96h), активируя сигнальный путь IGF-1 / AKT / p70S6 (тест Anova, в частности IGF-1 R: DM96h, CARN, по сравнению с DM96h; pAKT / AKT: DM96h, CARN, по сравнению с DM96h; pp70S6 / p70S6: DM96h, CARN, по сравнению с DM96h) и не влияли на пути ERKs (фигура 7).

4. Обсуждение
В последние десятилетия многочисленные исследования изучали положительное действие добавки CARN на физическую работоспособность, проливая новый свет на важность CARN как регулятора отбора топлива скелетных мышц и физиологической функции (длинноцепочечные жирные кислоты транспорт), при этом CARN играет роль не только в качестве эргогенного средства, но и в качестве фармакологического лечения патологических состояний, характеризующихся повреждением мышц [7, 8, 29].
Однако до настоящего времени не проводилось исследований, посвященных тому, может ли CARN положительно влиять на процесс дифференцировки мышц.
Наша работа является первым исследованием, показывающим, что увеличение содержания CARN в скелетных мышцах в мышиной иммортализованной клеточной линии C2C12 может модулировать процесс дифференцировки, регулируя передачу сигналов синтеза белка и реакцию на окислительный стресс.
Активация миогенных регуляторных факторов Myf5 и MyoD необходима для остановки прогрессирования сателлитных клеток и включения приверженности миобластов ранней дифференцировке мышечных клеток [20–22]. В нашем исследовании in vitro CARN способствует экспрессии этих факторов (рисунки 2 и 3), что подразумевает его способность усиливать приверженность сателлитных клеток.
Более того, CARN усиливает дифференцировку мышечных трубок, стимулируя экспрессию позднего миогенного регуляторного фактора миогенина и белка скелетных мышц MyHC (Рисунок 4), модулируя сигнальный путь IGF-1 / AKT / p70S6 (Рисунки 4 и 5). Более того, CARN усиливает дифференцировку мышечных трубок, стимулируя экспрессию позднего миогенного регуляторного фактора миогенина и белка скелетных мышц MyHC (рис. 4). Это и модулирование сигнального пути IGF-1 / AKT / p70S6 (Рисунки 4 и 5). Тот же самый регуляторный путь все еще активируется CARN в новообразованных мышечных трубках (Рисунок 7).Наши данные подтверждают недавние доказательства in vivo , показывающие, что добавление CARN увеличивает плазменные концентрации IGF-1 и его сигнальный путь [30–32]. Более того, значительная работа, в которой анализировалось влияние лечения CARN на профиль экспрессии микроРНК в скелетных мышцах крыс, предполагает, что повышение IGF-1 опосредуется на уровне микроРНК [33].
Интересно, что несколько исследований показали, что IGF-1 не только влияет на мышечную гипертрофию, но также ингибирует деградацию мышечного белка, ответственного за атрофию скелетных мышц [23, 34, 35].Этот эффект индуцируется активацией сигнального пути AKT, который ингибирует экспрессию белков (в частности, MuRF1 и атрогин-1), участвующих в убиквитин-протеасомной системе (UPS), высоко регулируемом механизме внутриклеточной деградации белков [24, 35, 36 ]. Подтверждая это свидетельство, несколько исследований на животных моделях описали, как добавки CARN приводят к подавлению экспрессии генов убиквитиновой протеасомной системы (UPS), модулируя высвобождение ингибиторов UPS, таких как IGF-1 [37–39].
Наши результаты не только подтверждают стимулирующий эффект CARN на путь IGF-1 / AKT / p70S6, но также показывают, что этот эффект продолжается на протяжении всего процесса дифференцировки. Они также показывают способность CARN усиливать процесс дифференцировки миобластов. Подтвержденные этими данными, мы позволяем распознать способность CARN оказывать благотворное влияние на регенерацию мышц, особенно в условиях, связанных с повышенной активностью UPS, например, при кахексии, связанной с раком или состоянии саркопении [40, 41].
Саркопения, потеря массы и функции скелетных мышц, которая происходит с возрастом, представляет собой сопутствующую потерю силы, аэробной способности и скорости метаболизма, которые способствуют снижению функции и качества жизни [37–41]. В настоящее время терапией первой линии для профилактики и лечения саркопении являются упражнения с отягощениями [6, 41, 42]. Основываясь на наших данных, поскольку CARN способствует вовлечению мышц, дифференцировке и активации пути IGF-1 / AKT / p70S6, он может представлять собой привлекательный новый препарат для профилактики и лечения саркопении.Кроме того, в нашей ранее опубликованной работе мы показали, что у определенной категории пациентов с липодистрофией прием L-ацетил-карнитина может улучшить состав тела [43]. Кроме того, CARN, по-видимому, способен не только изменять состав тела, но также способствовать переходу мышечных волокон, как показано на модели ожирения у крыс [44].
Кроме того, мы наблюдали, что во время дифференцировки CARN увеличивает количество ключевых белков, участвующих в антиоксидантном процессе (Рисунок 6), в соответствии с некоторыми исследованиями in vivo и in vitro антиоксидантной и антирадикальной активности CARN [45, 46].Это антиоксидантное действие CARN укрепляет его позицию в качестве многообещающего кандидата для профилактики и лечения состояний, связанных с травмами мышц. Фактически, CARN демонстрирует двойную роль в противодействии развитию мышечного истощения: со стороны, противодействуя образованию ROS, мощных индукторов UPS, и с другой стороны, усиливая путь IGF-1 / AKT / p70S6, мощный ингибитор UPS.
Как правило, существует обратная зависимость между эффективным окислением жирных кислот β в мышцах и производством активных форм кислорода (АФК) [46, 47].Предыдущие исследования показали, что повышенный окислительный стресс, развивающийся в ответ на перегрузку липидов, вызывает мышечную инсулинорезистентность. Фактически, пациенты с инсулинорезистентностью и / или сахарным диабетом 2 типа часто имеют нарушение окислительной способности скелетных мышц и неэффективное или неполное окисление жирных кислот β [48].
Важно подчеркнуть, что наши данные позволяют нам предположить, что в условиях инсулинорезистентности добавка CARN может предотвращать как неполное окисление жирных кислот β , так и процесс окислительного стресса, противодействуя возникновению состояний мышечной инсулинорезистентности.
Таким образом, учитывая его важность для биоэнергетики мышц и его антиоксидантный потенциал, добавление CARN можно рассматривать как помощь при дефиците CARN и при заболеваниях скелетных мышц. Несмотря на этот потенциал, необходимы дальнейшие исследования, чтобы окончательно выяснить механизмы, лежащие в основе его защитных эффектов, и проверить их безопасность и эффективность при лечении ряда различных заболеваний мышц.
Конфликт интересов
О потенциальном конфликте интересов не сообщалось.
Вклад авторов
Анна Монтесано и Памела Сенези разработали и провели эксперименты, проанализировали данные и написали статью. Ливио Лузи и Стефано Бендини внесли свой вклад в обсуждение и рецензировали документ. Илеана Терруцци руководила, проводила эксперименты и писала статью. Илеана Терруцци является гарантом этой работы и берет на себя ответственность за целостность данных и точность анализа данных. Все авторы прочитали и одобрили итоговую статью. Анна Монтесано и Памела Сенези внесли равный вклад в эту работу.
Amazon.com: Лучший доктор фумарат L-карнитина с карнитинами Biosint, 855 мг, 60 вегетарианских капсул: для здоровья и домашнего хозяйства
Помогает организму сжигать жир для получения энергии * — L-карнитин способствует выработке энергии в клетках, транспортируя жирные кислоты в митохондрии. Его основная функция — перенос длинноцепочечных жирных кислот через внутреннюю митохондриальную мембрану. Молекулы жирных кислот активируются до сложных эфиров кофермента A (CoA) в цитоплазме клетки, а затем этерифицируются до L-карнитина.Комбинация молекулы жирной кислоты и L-карнитина называется «ацилкарнитином». Большая часть содержания L-карнитина в организме хранится в форме ацил-карнитина.
Митохондрия — это печь, производящая энергию в клетке. Митохондрия, называемая «органеллой», представляет собой автономную структуру внутри клетки. Как и все клеточные структуры, митохондрия окружена мембраной. Эта мембрана является непроницаемым барьером для сложных эфиров ацил-КоА; прохождение через мембрану требует L-карнитина в качестве переносчика.На внутренней стороне митохондриальной мембраны сложные эфиры ацил-КоА становятся доступными для метаболизма в процессе бета-окисления. Одним из ключевых метаболических побочных продуктов этого процесса является ацетил-КоА, также называемый «активным ацетатом», который входит в цикл Кребса (также известный как «цикл лимонной кислоты»), чтобы поставлять топливо для производства АТФ, первичной энергии клетки ». валюта.’ L-карнитин выводит из митохондрии избыточные остатки жирных кислот, и в этой роли он важен для предотвращения токсического накопления жирных кислот внутри митохондрии.Данные свидетельствуют о том, что L-карнитин и эфиры ацил-карнитина с короткой цепью могут защищать митохондрии от неблагоприятного воздействия лекарств и токсичных химикатов.
Помогает поддерживать здоровье сердца и сердечно-сосудистой системы * — Мышечные ткани содержат высокую концентрацию L-карнитина. Благодаря постоянной потребности в энергии ткань сердечной мышцы особенно богата L-карнитином. Неудовлетворительное производство L-карнитина организмом может быть результатом множества факторов, включая повышенный катаболизм или неспособность тканей извлекать и удерживать L-карнитин из крови.
Наряду с глюкозой и лактатом жирные кислоты являются основным окислительным топливом для сердца. Помимо окисления жира для получения энергии в клетке, L-карнитин участвует в метаболизме глюкозы.
В высоких концентрациях L-карнитин демонстрирует явную способность усиливать сократительную способность изолированной ткани сердечной мышцы [in vitro?], Что указывает на усиливающий эффект на функцию сердца.Было показано, что 3 L-карнитин улучшает работоспособность крыс, подвергнутых усталостным испытаниям.
L-картин может способствовать поддержанию уровня липидов в крови. Предварительные доказательства этого были обнаружены в небольшом открытом испытании с участием 26 участников, которые ежедневно принимали 3 грамма L-карнитина в течение 40 дней.
Результаты этих и других исследований показывают, что пероральное употребление L-карнитина оказывает благотворное влияние на поддержание сердца и сердечно-сосудистой системы.
Безопасность — L-карнитин считается очень безопасным для перорального употребления. L-карнитин обычно хорошо переносится даже в дозах до 15 граммов в день.
Carnipure® L-карнитин | Lonza CHI
Что такое Carnipure®?
Торговая марка Carnipure® означает особый сорт L-карнитина, производимый швейцарской компанией Lonza.Продукты, отмеченные знаком качества Carnipure® на упаковке, показывают, что они содержат L-карнитин Lonza высокого качества.
Как работает L-карнитин
Основная метаболическая функция L-карнитина Carnipure® заключается в транспортировке длинноцепочечных жирных кислот в матрикс митохондрий для бета-окисления. Бета-окисление — это метаболический путь использования жира в качестве источника энергии. Этот путь происходит в части клетки, называемой митохондриальным матриксом, и L-карнитин необходим для транспортировки жирных кислот в это пространство.
L-карнитин — это естественное питательное вещество, синтезируемое в организме путем бета-окисления в митохондриальном матриксе. L-карнитин переносит жирные кислоты и помогает оптимизировать выработку энергии.
Качество и безопасность
Под брендом Carnipure® компания Lonza предлагает два сорта: кристаллический Carnipure® и тартрат Carnipure®. Кристаллический Carnipure® представляет собой чистый L-карнитин, тогда как тартрат Carnipure® представляет собой кристаллизованную стабильную соль, полученную из кристаллической кислоты Carnipure® и пищевого эквивалента L-винной кислоты в молярном соотношении 2: 1 ( i.е., приблизительно 68% L-карнитина и 32% L-винной кислоты, что является наивысшей концентрацией L-карнитина из любой коммерчески доступной в настоящее время негигроскопической солевой формы).
Carnipure® кристаллический и Carnipure® тартрат одобрены и / или приняты в большинстве стран, таких как США, Европейский Союз, Япония, Китай и т. Д .:
Кодекс Алиментариус перечисляет оба ингредиента для использования в детских смесях.
Продукты одобрены для использования в пищевых продуктах с определенным питанием (ПАРНАТЫ).
Продукция имеет положительную оценку безопасности EFSA (European Food Safety Authority).
Продукция подтверждена сертификатом GRAS (общепризнано безопасным).
Приложения Carnipure®
Спорт: упражнения и восстановление
Carnipure® L-карнитин играет важную роль в облегчении процесса восстановления в ответ на физическую активность. В этой роли Carnipure® L-карнитин помогает защитить эндотелиальные клетки от дефицита L-карнитина (тем самым положительно влияя на маркеры катаболизма пуринов), способствует уменьшению повреждения тканей и болезненности мышц и способствует общему процессу восстановления.L-карнитин Carnipure® становится ключевым ингредиентом в составах для тренировок и восстановления по всему миру.
В частности, L-карнитин Carnipure® обеспечивает преимущества в этом применении, начиная от поддержки здорового кровотока, снижения маркеров метаболического стресса, уменьшения болезненности мышц и увеличения времени восстановления.
L-карнитин для контроля веса
В случае контроля веса конечной целью является уменьшение жировой массы при сохранении мышечной массы.Хотя управление весом и поддержание энергии — это разные области применения, оба требуют использования жирных кислот, их расщепления и преобразования в энергию в форме АТФ. Carnipure® L-карнитин — это питательное вещество, необходимое для поддержки преобразования жира в метаболическую энергию. Поскольку добавка Carnipure® может увеличивать бета-окисление, это приводит к экономии глюкозы и снижению расщепления аминокислот для производства энергии.
L-карнитин для энергии
В случае стабильной энергии преобразование жирных кислот в АТФ (аденозинтрифосфат) может обеспечить более длительный источник энергии.
L-карнитин для детского питания
Грудное молоко содержит L-карнитин, который необходим для транспортировки длинноцепочечных жирных кислот и других органических кислот через митохондриальные мембраны. У младенцев, получающих диету без карнитина, снижается уровень L-карнитина в плазме и тканях, и у них могут развиваться нарушения, связанные с окислением жирных кислот, метаболизмом соединений ацил-КоА, кетогенезом и азотным балансом. Комитет ESPGHAN по питанию (Европейское общество педиатрической гастроэнтерологии, гепатологии и питания) рекомендует, чтобы детские смеси содержали L-карнитин на уровнях, аналогичных тем, которые содержатся в грудном молоке.Синтез L-карнитина у новорожденных менее эффективен, чем у взрослых, и, по-видимому, недостаточен для удовлетворения требований. Таким образом, L-карнитин считается условно незаменимым питательным веществом для младенцев и детей.
L-карнитин для здорового старения
Пожилые люди имеют меньшую потребность в энергии, и их привычки в еде меняются с возрастом. Например, они обычно потребляют меньше мяса. В то же время снижается потребление с пищей как L-карнитина, так и питательных веществ, необходимых для производства L-карнитина.Исследователи также могут показать снижение эндогенного синтеза. В литературе часто описывается снижение уровня L-карнитина в различных частях тела с возрастом. Результирующее снижение энергетического обмена из-за более низких уровней L-карнитина может быть восстановлено добавлением L-карнитина.
L-карнитин для беременных
Появляется все больше доказательств того, что L-карнитин может играть важную роль во время беременности, особенно у женщин, соблюдающих диету с пониженным содержанием мяса или вегетарианскую диету, для которой ежедневное потребление L-карнитина может быть слишком низким для удовлетворения повышенных потребностей во время беременности.Благодаря превосходному профилю безопасности добавка Carnipure® может быть подходящей для беременных женщин для поддержки восстановления их уровня L-карнитина в плазме и в то же время для снижения свободных жирных кислот в плазме. Конечно, беременным женщинам всегда следует проконсультироваться с врачом, прежде чем принимать какие-либо диетические добавки.
Мужская фертильность
L-карнитин может играть важную роль в репродуктивном здоровье мужчин, в основном из-за повышенного окисления митохондриальных жирных кислот, что приводит к улучшению подвижности сперматозоидов придатка яичка.Клинические исследования показывают, что прием L-карнитина в течение периода от 3 до 6 месяцев может положительно повлиять на концентрацию сперматозоидов, количество сперматозоидов, процент подвижных сперматозоидов и процент сперматозоидов с быстрым прогрессированием. Добавки Carnipure® следует рассмотреть мужчинам, заинтересованным в поддержке своей репродуктивной системы.
Оценка воздействия L-карнитина на ожирение печени medaka (Oryzias latipes)
О роли L-карнитина в снижении веса у людей и мышей сообщалось в ряде исследований.В них снижение веса было результатом комбинации приема L-карнитина и ходьбы у женщин с избыточным весом ⁹ или приема L-карнитина в течение 14 дней в модели, включающей тренировку на выносливость ¹⁰. На людях большинство исследований не показывают положительного влияния L-карнитина на снижение веса. В настоящем исследовании также не было явного изменения веса в группе HFD + L-карнитин по сравнению с группой HFD после 2 недель введения L-карнитина.
Об улучшении ожирения печени у людей и мышей сообщалось в нескольких исследованиях. Малагуарнера и др. . сообщили об опосредованном L-карнитином улучшении уровней глюкозы в плазме, липидных профилей и гистологических проявлений у пациентов с НАСГ ¹¹. Ся и др. . сообщили, что добавки L-карнитина улучшили жировую дистрофию печени у мышей с диабетом 2 типа и что повышение окисления жирных кислот и снижение соотношения L-карнитин / актил-L-карнитин имеют важное значение ¹².Что касается моделей рыб, то есть отчет, показывающий, что введение L-карнитина сомам привело к изменению липидного обмена, что вызвало отложение липидов в печени и мышцах ¹³. В текущем исследовании окрашивание тканей показало уменьшение липидного отложения в печени при введении L-карнитина. Таким образом было продемонстрировано, что введение L-карнитина может быть полезным для улучшения ожирения печени. Кроме того, как сообщалось ранее, мы наблюдали увеличение экспрессии SOD2, которая, как известно, участвует в пути митохондриального окислительного стресса ¹⁴.Результат подтверждает идею о том, что подавление окислительного стресса в печени с помощью L-карнитина предотвращает развитие НАСГ.
Метаболомный анализ, который был проведен для более подробной оценки механизмов улучшения ожирения печени с помощью L-карнитина, продемонстрировал 4,4-кратное увеличение количества L-карнитина, обнаруживаемого в печени после введения L-карнитина. Ранее сообщалось об увеличении физиологического уровня L-карнитина в 1,7 раза на мышиной модели NASH ¹⁵.Причина большего увеличения в нашем исследовании, по-видимому, заключается в том, что чрезмерное количество L-карнитина выводится с мочой у мышей, в то время как в модели medaka соединение растворялось в воде в резервуаре, что позволяло medakas поддерживать более высокий уровень L-карнитина. уровни. Наблюдалось повышение уровней метаболитов L-карнитина, бутирилкарнитина (соотношение: 7,7) и O-ацетилкарнитина (соотношение: 14,0), а также снижение отношения LC / ALC (таблица 2). Кроме того, хотя статистическая значимость не может быть рассчитана для значений ниже пределов обнаружения, можно считать, что уровни ацетил-КоА и АТФ увеличились при введении L-карнитина, что предполагает усиление β-окисления липидов с образованием ацетил-КоА, в результате чего в производстве АТФ (таблица 1).Также было увеличение АДФ (соотношение: 2,0), но коэффициент увеличения был выше для АТФ (соотношение: 3,4). То есть уровень АТФ был повышен больше, чем АДФ, что можно увидеть из соотношения АТФ / АДФ, которое предполагает, что увеличение пула адениновых нуклеотидов активирует производство большего количества АТФ. Об увеличении продукции АТФ L-карнитином также сообщалось в исследовании, показывающем, что в первичных хондроцитах человека продукция АТФ увеличивалась через 24 часа после введения 1 мМ L-карнитина.
Среди других метаболитов, показавших значительные изменения в метаболомном анализе, спермидин (соотношение: 1.3), полиамин, обладающий сильной антиоксидантной активностью, действует как собственный поглотитель свободных радикалов. Спермидин синтезируется из спермина спермидином / спермин N1-ацетилтрансферазой с использованием ацетил-КоА в качестве субстрата.
Также наблюдалось увеличение содержания дигидроксиацетонфосфата (DHAP) (соотношение: 1,5). Глицерин превращается в DHAP через глицерин-3-фосфат и вступает в гликолитический путь для метаболизма. Следовательно, увеличение DHAP предполагает улучшение липолиза ¹⁶.
Наблюдалось снижение уровня 3-метилгистидина (соотношение: 0.6). Сообщается, что уровень этой молекулы в крови можно использовать в качестве индекса катаболизма белка ¹⁷. Результат предполагает, что, поскольку липиды используются в качестве источника энергии, потребность в энергии от катаболизма белка меньше.
Ацетилированный L-карнитин проникает через гематоэнцефалический барьер через мембранные рецепторы, попадает в мозг и превращается в ГАМК. Фактически, исследование показало, что L-карнитин снижает уровень аммиака у пациентов с циррозом печени и улучшает чувство усталости ¹¹.
2-Аминоадипиновая кислота (2-AAA) (соотношение: 0,7), продукт разложения лизина, который не был полностью охарактеризован, является потенциальным модулятором гомеостаза глюкозы у людей. 2-ААА является важным маркером при оценке риска развития диабета у людей. Исследование показало, что люди с уровнями 2-AAA в верхнем квартиле имеют 4-кратный риск развития диабета по сравнению с остальной частью населения ¹⁸. Поэтому интересно, что 2-ААА было снижено в группе с введением L-карнитина, поскольку это предполагает возможное снижение риска диабета.
В печени ацил-КоА, образующийся из свободных жирных кислот, переносится в митохондрии через карнитиновый челнок и превращается в ацетил-КоА, который метаболизируется в цикле TCA. Известно, что кетоновые тела образуются из ацетил-КоА, когда большое количество ацил-КоА остается неметаболизированным после цикла TCA. Однако в текущем исследовании после введения L-карнитина увеличения кетоновых тел не наблюдалось (рис. 3а). Это предполагает эффективный транспорт ацил-КоА в митохондрии и последующий метаболизм.
Кроме того, в последние годы внимание привлекло то, что диетический L-карнитин, по-видимому, вызывает ускорение атеросклероза из-за его превращения в организме в триметиламин (ТМА) и триметиламин-N-оксид (ТМАО) кишечным путем. Бактерии ¹⁹. В текущем исследовании ни ТМА, ни ТМАО не были обнаружены в повышенных уровнях ни в группе HFD, ни в группе HFD + L-карнитин. Тот факт, что ТМА и ТМАО были обнаружены в группе с нормальной диетой, предполагает, что количество ТМА или ТМАО, синтезированных в нашей модели медака в ответ на введение L-карнитина, было небольшим.
В общем, L-карнитин не требуется для коротко- и среднецепочечных жирных кислот для проникновения в митохондриальный матрикс, как описано ранее, но необходим для длинноцепочечных жирных кислот для этого. Чтобы проанализировать липидные профили более подробно, мы провели анализ липидов с помощью ГХ-МС. Хотя изменения не были значительными, большинство измеренных жирных кислот в целом снизилось в группе L-карнитина. Уровни линолеата (18: 6n-6), маргарита (17: 0), ганма-линолената (18: 3n-6), арахидоната (20: 4n-6) и пентадеканоата (15: 0) были значительно ниже при HFD. + Группа L-карнитина по сравнению с группой HFD.Такое предпочтение длины ацильной цепи, вероятно, зависит от субстратной специфичности ферментов ацил-коэнзим А-синтетазы (ACS; EC 6.2.1.x), «активаторов» жирных кислот, которые образуют тиоэфир с CoA ²⁰. Однако об этом механизме еще многое неизвестно, и детали еще предстоит изучить. Могут быть предприняты дальнейшие исследования детальной взаимосвязи между длиной цепи жирных кислот и β-окислением жирных кислот L-карнитином.
Хотя известно, что n-3 полиненасыщенные жирные кислоты, такие как EPA и DHA, обладают противовоспалительной и противораковой активностью, их подробные механизмы действия полностью не изучены.EPA преобразуется ферментом удлинения в DPA, который преобразуется в DHA с помощью фермента десатурации. При стимуляции клеток арахидонат полиненасыщенной жирной кислоты (20: 4n-6) высвобождается из клеточной мембраны фосфолипазой A2. Впоследствии простагландин и тромбоксан, генерируемые циклооксигеназой, а также лейкотриены, генерируемые липоксигеназой из арахидоната (20: 4n-6), действуют как липидные медиаторы. Поскольку было показано, что EPA и DHA уменьшаются при введении L-карнитина у Pagrus major ²¹, мы проанализировали эффекты одновременного приема L-карнитина и EPA.Когда вводили только EPA, наблюдалось значительное увеличение жирных кислот, полученных из EPA, DHA и DPA, и значительное снижение стеарата и арахидоната (20: 4n-6) (таблица 3). Мы также обнаружили, что отложение жира в печени увеличивалось в каждой группе EPA (дополнительный рис. S1), предполагая, что большая часть отложенного жира представляет собой жирную кислоту, полученную из EPA, и изменение состава жирных кислот эффективно в улучшении ожирения печени. Есть отчет, показывающий, что только EPA увеличивает окисление митохондриальных жирных кислот, в то время как DHA увеличивает пероксисомное окисление жирных кислот ²².Однако результаты настоящего исследования показали, что β-окисление некоторых жирных кислот не сильно изменилось при введении EPA, что позволяет предположить, что EPA менее эффективно снижает уровни жирных кислот, чем L-карнитин. Несмотря на это, в нашем исследовании наблюдалось снижение уровня омега-6 жирных кислот, как сообщалось ранее, что подтверждает полезность введения EPA. Анализ липидного обмена при одновременном введении HFD, L-карнитина и EPA по сравнению с таковым при введении HFD показал значительное увеличение уровней EPA и DHA и снижение уровней арахидоната (20: 4n-6) (Таблица 4).Содержание других жирных кислот, содержание которых снижалось при введении L-карнитина, не снижалось при одновременном введении L-карнитина и EPA. Эти данные показывают, что повышенный уровень EPA предотвращает β-окисление других жирных кислот.
Значительное снижение уровня арахидоната (20: 4n-6) может быть причиной противовоспалительного действия. Возможно, что при введении L-карнитина EPA предпочтительно использовалась для β-окисления по сравнению с другими жирными кислотами. Повышение уровня омега-3 жирных кислот, которые, как известно, уменьшают количество жира в печени на основании опубликованных клинических исследований ²³, и снижение уровня арахидоната (20: 4n-6) являются наиболее важными преимуществами одновременного приема EPA и L-карнитина.На данный момент было сообщено только о нескольких подробных исследованиях эффектов одновременного приема EPA и L-карнитина, но важные результаты нашего исследования требуют дальнейших исследований для оценки потенциального применения у человека. L-карнитин — очень удобное средство, в клинических исследованиях которого не сообщалось о каких-либо значительных побочных эффектах у людей. Кроме того, в нашем исследовании у медаков не наблюдалось побочных эффектов. В заключение мы оценили полезность L-карнитина, используя модель ожирения печени medaka.Текущее исследование показало, что введение одного L-карнитина эффективно в уменьшении ожирения печени, а одновременное введение L-карнитина и EPA повышает эту эффективность. Детальное влияние L-карнитина на метаболизм липидов на уровне метаболома было проанализировано на основе результатов, полученных с использованием небольшой рыбы, медаки, в текущем исследовании, и ожидается, что эти результаты будут полезны для разработки методов лечения заболеваний печени, связанных с ожирением. будущее.
Неожиданные эффекты приема L-карнитина на липидный метаболизм у пациентов, находящихся на гемодиализе — FullText — Исследование почек и артериального давления 2018, Vol.43, № 4
Аннотация
Предпосылки / цели: Появляется все больше доказательств того, что длительное лечение гемодиализом (HD) приводит к нарушениям гомеостаза карнитина, но результаты приема добавок L-карнитина у пациентов с HD противоречивы. В настоящем проспективном исследовании мы исследовали эффективность внутривенного введения L-карнитина в уменьшении потери энергии белка (PEW), связанной с диализом, на основе уровней альбумина до лечения. Методы: Пятьдесят пациентов (46% мужчин, средний возраст 63 ± 18,28 года, возраст ГД 37,5 (7-288) месяцев) получали 1 г L-карнитина внутривенно в конце каждого сеанса ГД в течение 12 месяцев. Клинические данные были получены из медицинских карт и карт. Регистрировались периоды интрадиалитической гипотензии (определяемые как снижение систолического артериального давления на ≥ 20 мм рт. Ст.). До приема L-карнитина диетические привычки оценивались с помощью анкеты для самостоятельного заполнения. Лабораторные параметры измеряли до приема добавок и контролировали с интервалом в 6 месяцев.Перед сеансом HD проводились антропометрические измерения, включая «сухой» вес и рост, индекс массы тела (ИМТ) и анализ состава тела с использованием биоимпедансной спектроскопии. Оценка недостаточности питания-воспаления (MIS) использовалась в качестве системы оценки, отражающей тяжесть PEW и индикатора общей функциональной способности. Результаты: Было обнаружено значительное увеличение общего холестерина, преимущественно за счет ЛПНП (p = 0,005). Одновременно снизился уровень ЛПВП (p = 0.001), в то время как уровни триглицеридов остались неизменными. Хотя можно было наблюдать повышение уровня преальбумина в сыворотке крови, индекс мышечной ткани (LTI) снизился, а индекс жировой ткани (FTI) увеличился, что привело к снижению отношения LTI / FTI (p = 0,002). При разделении на две группы в соответствии со значениями альбумина до лечения (<35 г / л или ≥35 г / л) пациенты из группы с более высоким содержанием альбумина показали значительное увеличение преальбумина (p = 0,005) и улучшение MIS (p = 0,03). Многофакторный регрессионный анализ показал, что более высокий уровень FTI после введения L-карнитина приводит к большей гемодинамической стабильности (OR 1.709, 95% ДИ 1,006–2,905, p = 0,048). Поскольку не было различий в характеристиках лечения HD, первичном заболевании почек или остаточном диурезе, мы могли сделать вывод, что положительный энергетический баланс (с увеличением преальбумина и FTI) в конечном итоге привел к лучшей гемодинамической стабильности. Заключение: Наши результаты показывают значительное влияние добавок L-карнитина на метаболизм липидов. Необходимы дальнейшие клинические испытания, а также экспериментальные исследования, чтобы определить роль липидного метаболизма в популяции с ХЗП.Значительные преимущества приема L-карнитина у пациентов с лучшим исходным уровнем сывороточного альбумина позволяют предположить, что эту терапию не следует ограничивать пациентами с наихудшим нутритивным и общим статусом.
© 2018 Автор (ы). Опубликовано S. Karger AG, Базель
Введение
Карнитин является важным кофактором фермента в энергетическом обмене, играя жизненно важную роль в β-окислении длинноцепочечных жирных кислот [1, 2].Учитывая решающую роль, которую он играет, концентрации карнитина в плазме и тканях следует поддерживать относительно постоянными. Посредством канальцевой реабсорбции, синтеза L-карнитина и селективной экскреции короткоцепочечных эфиров карнитина почки являются одним из ключевых элементов в сохранении этого баланса [3]. Таким образом, хроническая болезнь почек (ХБП) приводит к значительным нарушениям гомеостаза карнитина, особенно уровней свободного карнитина в плазме и отложений карнитина в мышцах [4]. Связанный с диализом дефицит карнитина (определяемый как преддиализная концентрация свободного карнитина в плазме <40 мкмоль / л) проявляется как наложение анемии, гипореактивной на терапию эритропоэтином (ЭПО), интрадиализной гипотензии (IDH), сердечно-сосудистых (CV) осложнений и дисфункции скелетных мышц [ 5].Однако результаты приема добавок L-карнитина у пациентов, находящихся на гемодиализе (HD), противоречивы. В некоторых сообщениях утверждалось, что L-карнитин оказывает благотворное влияние на уменьшение гипореактивности EPO, уменьшение мышечных спазмов, связанных с диализом, и улучшение липидного профиля сыворотки [6-8]. В других исследованиях такие эффекты продемонстрировать не удалось [9, 10].
Мы предположили, что добавка L-карнитина, играющая главную роль в качестве промежуточного звена метаболизма, может улучшить нутритивный статус у пациентов с HD.Основная цель этого проспективного исследования состояла в том, чтобы оценить эффективность внутривенного введения L-карнитина в снижении связанных с диализом белково-энергетических потерь (PEW) на основе уровней альбумина перед лечением.
Материалы и методы
Настоящее исследование проводилось в отделении диализа Университетского госпитального центра (UHC) Загреба. Исследование было одобрено комитетом по этике UHC Zagreb. Среди 121 пациента, пролеченного в нашем отделении, в общей сложности 50 пациентов получали 1 г L-карнитина (Carnitene Sigma-Tau, Alfasigma Group) внутривенно (5 мл препарата применялись медленно в течение 2-3 минут) в конце каждого сеанса HD для 12 месяцев.Критерии включения были следующие: минимум 6 месяцев лечения HD, плохой аппетит с непреднамеренной потерей веса ≥ 5% в течение 3 месяцев и признаки PEW с уровнем сывороточного альбумина ≤ 38 г / л и шкалой недостаточности питания-воспаления (MIS) ≥ 5. Критерии исключения: неконтролируемое и нелеченное злокачественное заболевание, сахарный диабет и гиполипидемическая терапия. Клинические данные были получены из медицинских карт и карт. Сюда входили демографические данные, основное заболевание почек, данные об исходе HD и характеристики лечения (продолжительность, скорость ультрафильтрации (UF), кровоток, Kt / V), терапия ЭПО и внутривенная доза железа, артериальное давление (АД) до и после сеанса диализа. как остаточная функция почек (суточный диурез> 300 мл).Регистрировались периоды ИДГ (определяемые как снижение систолического артериального давления на ≥ 20 мм рт. Ст.). Следующие диетические привычки были оценены с использованием анкеты для самостоятельного заполнения перед добавлением L-карнитина — количество приемов пищи в день, пропуск завтрака, пропуск интрадиалитического приема пищи и количество мясных продуктов, потребляемых еженедельно. Аппетит оценивался через 6 и 12 месяцев после начала приема добавок. Лабораторные параметры измеряли до приема добавок и контролировали с интервалом в 6 месяцев.Перед сеансом HD были выполнены антропометрические измерения, включая «сухой» вес и рост, индекс массы тела (ИМТ) и анализ состава тела с помощью биоимпедансной спектроскопии (монитор состава тела Fresenius Medical Care — BCM). MIS использовался в качестве балльной системы, отражающей тяжесть PEW и индикатора общей функциональной способности [11].
Статистический анализ
Статистический анализ выполняли с использованием Stata / SE 11.2 для Windows (StataCorp LP, США).Различия между двумя группами анализировали с помощью критерия Пирсона χ ² (или точного критерия Фишера, если любая ожидаемая частота ячеек в таблице непредвиденных обстоятельств была ≤ 5) для категориальных переменных, с помощью теста Стьюдента t для нормально распределенных непрерывных переменных и Уилкоксона. тест на ненормально распределенные непрерывные переменные, на уровне значимости P <0,05. Корреляция порядка рангов Спирмена использовалась для определения корреляции между переменными.
Результаты
Было 23 пациента мужского пола (46%) и 27 женщин (54%), средний возраст 63 ± 18 лет.28 лет. Ведущей причиной ХБП был хронический гломерулонефрит (36%), за ним следовали нефроангиосклероз (18%) и поликистоз почек (ПКБ) (16%). Среднее время, проведенное на ГД, составило 37,5 (7–288) месяцев, при минимальном времени лечения 3 часа 2–4 раза в неделю, скорости кровотока 290,8 (250–350) мл / мин и среднем Kt / V 1,29. Бикарбонат HD и сверхчистый диализат со скоростью потока 500 мл / мин использовались для всех пациентов, а также диализаторы из полисульфона с высокой пропускной способностью. Симптоматическая ИДГ возникла у 26% пациентов (у 9.79% сеансов диализа) до применения L-карнитина. Первичное заболевание почек не повлияло ни на параметры питания, ни на эффекты приема L-карнитина. Тест Вилкоксона показал, что добавление L-карнитина в нашей когорте не влияло на уровень гемоглобина и не приводило к изменению дозы эритропоэтина или внутривенного введения железа. Было 8 пациентов с PKD. Уровень гемоглобина у них составлял 118 г / л (диапазон 99,8-128,5) до и 116,5 г / л (диапазон 95,8-137) (p = 0,73) после лечения L-карнитином, в то время как у пациентов с другими первичными заболеваниями почек уровень гемоглобина был. 109 г / л (диапазон 96-115) до и 110 г / л (104.5-118) после лечения L-карнитином соответственно (p = 0,51).
Добавки L-карнитина оказали выраженное влияние на метаболизм липидов в течение одного года. Концентрации холестерина ЛПВП в сыворотке снизились, в то время как уровни холестерина ЛПНП и индекс жировой ткани (FTI) значительно увеличились. Хотя фракция преальбумина увеличилась, индекс мышечной ткани (LTI) упал, что привело к снижению соотношения LTI / FTI (Таблица 1).
Таблица 1.
Параметры в обеих группах в соответствии со значениями альбумина до и после приема L-карнитина.* Тест Вилкоксона
При разделении на две группы в соответствии со значениями альбумина перед лечением (<35 г / л или ≥35 г / л) у пациентов в группе с низким содержанием альбумина уровень преальбумина увеличился с 0,45 до 0,5 г / л (p = 0,055) и немного снизился MIS с 11,5 до 11 (p = 0,899) (рис. 1, A и B). Однако пациенты из группы с более высоким содержанием альбумина показали значительное увеличение преальбумина с 0,6 до 0,7 г / л (p = 0,005) и улучшение MIS с 8 до 6 (p = 0,03, рис. 2, A и B). Эти пациенты также показали значительное улучшение аппетита и улучшение функциональных возможностей (точный тест Фишера, p = 0.021). Те же эффекты L-карнитина также явно присутствовали после анализа пациентов в соответствии с их первичным заболеванием почек (PKD по сравнению с другим первичным заболеванием почек, Таблица 2). Группы не различались по количеству сеансов диализа в неделю (в среднем 2,92 против 2,89, p = 0,56), времени проведения диализа (медиана 103,5 (12-110) против 98 (7-288) месяцев, p = 0,64), Kt / V (среднее 1,2 ± 0,33 против 1,31 ± 0,22, p = 0,62) или остаточный диурез (медиана 750 (0-2000) против 560 (0-2000) мл, p = 0,35) для альбумина <35 г / л или ≥35 г / л группы соответственно.Также не было различий в диетических привычках между группами.
Таблица 2.
Параметры в группах в соответствии с первичным заболеванием почек до и после приема L-карнитина. * Тест Вилкоксона
Рис. 1.
Изменения в баллах от недоедания-воспаления после приема L-карнитина в соответствии с показателями альбумина до лечения.
Рис. 2.
Изменения преальбумина после приема L-карнитина в зависимости от значений альбумина до лечения.
До введения L-карнитина с увеличением ИМТ, FTI также увеличивался (Rho = 0,758, p <0,001) при снижении отношения LTI / FTI (Spearman Rho = -0,571, p <0,001, рис. 3, А и Б). После введения L-карнитина эти корреляции были более выраженными (Rho 0,770 и -0,582 соответственно, p <0,001). Многофакторный регрессионный анализ показал, что более высокий уровень FTI после введения L-карнитина приводит к большей гемодинамической стабильности, при этом количество эпизодов IDH значительно снижается в течение 12-месячного периода (OR 1.709, 95% ДИ 1,006–2,905, p = 0,048) и проявляется только у 8% пациентов (в 5,48% сеансов диализа; точный критерий Фишера, p = 0,049, таблица 3).
Таблица 3.
Распределение пациентов с гипотонией и без нее до и после приема L-карнитина. * Точный тест Фишера
Рис. 3.
Изменения соотношения LTI / FTI после приема L-карнитина в зависимости от значений альбумина до лечения.
Лечение L-карнитином не имело отрицательных последствий для адекватности диализа (среднее значение Kt / V составляло 1.29 до и 1,32 после лечения L-карнитином, точный критерий Фишера p = 0,24), а также не было никаких побочных эффектов лечения.
Обсуждение
Наши результаты продемонстрировали заметное влияние внутривенного введения L-карнитина на липидный обмен. Было обнаружено значительное увеличение общего холестерина, преимущественно за счет ЛПНП. Одновременно снизился уровень ЛПВП, а уровень триглицеридов остался неизменным. Хотя можно было наблюдать повышение уровня преальбумина в сыворотке, LTI снизился, а FTI увеличился, что привело к снижению соотношения LTI / FTI.Хотя сначала эти изменения кажутся отрицательными, они были связаны с улучшением гемодинамической стабильности, MIS и аппетита и были более выраженными у пациентов с более высокими исходными уровнями альбумина.
Наше исследование показало, что 12 месяцев внутривенного введения L-карнитина не повлияли на уровень гемоглобина и не привели к снижению потребности в ЭПО. Это открытие согласуется с исследованием Хендельмана от 2006 года, которое показало, что 6-месячное введение L-карнитина пациентам в большом диализном отделении не привело к изменению дозы гемоглобина или ЭПО [12].Мета-анализ Hurot et al. предположили положительное влияние добавки L-карнитина на контроль анемии у пациентов с HD с уменьшением индекса резистентности к ЭПО и улучшением эффективности ЭПО по сравнению с контрольными группами. Они не смогли найти картину реакции на дозу и не заметили временного промежутка для этого эффекта [13]. Из-за небольшого количества исследований и ограниченного количества пациентов Chen et al. недавно провели еще один метаанализ, который не подтвердил эти выводы [8].
Согласно нашим результатам, добавка L-карнитина значительно снизила количество эпизодов ИДГ (OR 1.709, 95% ДИ 1,006–2,905, p = 0,048), что усложняет только 5,48% сеансов диализа; Точный критерий Фишера, p = 0,049). IDH — частое осложнение HD, которое может привести к преждевременному прекращению лечения, хроническому недостаточному диализу и более высокой смертности. Это в основном связано с плохой компенсаторной реакцией на ультрафильтрацию, с вегетативной или барорецепторной недостаточностью или нарушением сердечной функции, что приводит к чрезмерному венозному объединению и аномальной вазодилатации [14]. Новые данные также предполагают, что дисфункция митохондрий может играть главную роль в развитии осложнений, связанных с ХБП.Это приводит к окислительному стрессу митохондрий и стойкому повреждению тканей. Поскольку L-карнитин является важным кофактором фермента в энергетическом метаболизме, он может быть одной из так называемых молекул, нацеленных на митохондрии, которые могут модулировать специфический каскад передачи сигналов и приводить к значительному улучшению клеточной защиты от хронического воспаления и окислительного стресса [15 ]. Более того, после проведения многомерного регрессионного анализа мы смогли показать связь между увеличением FTI и меньшим количеством эпизодов IDH, что может свидетельствовать о том, что положительный энергетический баланс (с увеличением преальбумина и FTI) и снижение MIS в конечном итоге привели к улучшению гемодинамическая стабильность.
Взаимосвязь между терапией L-карнитином и метаболизмом липидов широко исследовалась, но с противоречивыми результатами. Наши данные контрастируют с ранее опубликованными исследованиями, в которых описаны либо положительные эффекты, либо отсутствие каких-либо изменений. Благоприятными эффектами авторы подчеркнули значительное снижение уровней триглицеридов, свободных жирных кислот и холестерина (общего и фракции ЛПНП) и повышение уровня ЛПВП [16-19]. С другой стороны, результаты, полученные в двух систематических обзорах и метаанализе, не предоставили доказательств того, что L-карнитин может влиять на метаболизм липидов [13, 20].Эти различия, возможно, можно объяснить дозозависимыми эффектами карнитина, предложенными в некоторых сообщениях [8, 21].
Сердечно-сосудистые (СС) осложнения являются ведущей причиной смертности у пациентов с HD, при этом ускоренный атеросклероз и PEW являются одними из наиболее важных факторов риска, ведущих к плохому исходу [22]. Хотя ожирение, гиперхолестеринемия и более высокие значения АД являются общепризнанными факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний и плохим исходом в общей популяции, похоже, что более высокие, а не более низкие значения этих факторов риска действуют защитно у пациентов с ХБП [23–26].Это явление называется «обратной эпидемиологией» или «парадоксом риска диализа» [23, 26, 27]. До сих пор было предложено несколько возможных механизмов, объясняющих благоприятное влияние более высокого ИМТ на выживаемость. Все гипотетические эксплантации приводят к одному конкретному пункту — жировая ткань не только служит хранилищем липидов, но также является высокоактивным эндокринным органом [28, 29]. Поскольку PEW определяется не только постоянным снижением запасов белка, но и жировых отложений, его лечение представляет собой сложную задачу и должно быть сосредоточено на поддержании запаса энергии в целом.
Несмотря на то, что наши результаты противоречат ранее опубликованным исследованиям [13, 16-20], можно предположить, действительно ли это небольшое, но значительное повышение общего холестерина и холестерина ЛПНП и FTI может быть защитным у пациентов с HD. Хотя сначала эти изменения можно было назвать нежелательными, они привели к значительному улучшению MIS и были связаны с гораздо лучшим аппетитом. Кроме того, увеличение ИМП привело к меньшему количеству эпизодов ИДГ. Поскольку не было различий в характеристиках лечения HD, первичном заболевании почек или остаточном диурезе, мы могли сделать вывод, что положительный энергетический баланс (с увеличением преальбумина и FTI) в конечном итоге привел к лучшей гемодинамической стабильности.Эта гипотеза заслуживает дальнейшего изучения. Хотя лечение L-карнитином не имело отрицательных последствий для показателей Kt / V, следует тщательно контролировать параметры адекватности диализа.
Наше исследование имеет некоторые ограничения, включая небольшой размер выборки, отсутствие контрольной группы, ограниченную лабораторную оценку метаболизма липидов и короткое наблюдение. При оценке диетических привычек с использованием вопросника, заполняемого самостоятельно, до приема L-карнитина различий между этими двумя группами не было.Однако более детального анализа приема пищи не проводилось. Таким образом, существует вероятность того, что у первой группы не было таких же диетических привычек, как у другой анализируемой группы. Хотя это может быть потенциальным источником систематической ошибки, пациенты из группы с более высоким содержанием альбумина четко заявили об улучшении аппетита и функциональных возможностей, что, по нашему мнению, привело к улучшению уровня преальбумина в сыворотке и снижению MIS. Это также отражалось в изменениях липидного профиля сыворотки и уровней фосфора.
Кроме того, в дальнейших исследованиях может оказаться полезным сравнение измерений состава тела до и после диализа, а также более подробный анализ потребления пищи.Необходимы дальнейшие клинические испытания, а также экспериментальные исследования, чтобы определить роль липидного метаболизма в популяции с ХЗП.
Заключение
Результаты нашего исследования показали значительное влияние добавок L-карнитина на липидный обмен. Значение увеличения FTI остается неясным, хотя это может быть следствием увеличения «здоровой» и защитной жировой ткани. Из-за значительных преимуществ приема добавок L-карнитина у пациентов с лучшими исходными уровнями сывороточного альбумина, эту терапию не следует ограничивать пациентами с наихудшим нутритивным и общим статусом.
Благодарности
Все авторы внесли значительный вклад в соответствии с определением, установленным ICMJE. Не было никаких вмешательств, которые могли бы поставить под вопрос предвзятость в представленной работе или в изложенных выводах, последствиях или мнениях.
Заявление о раскрытии информации
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в отношении публикации этой статьи.
Список литературы
Линч К.Э., Фельдман Х.И., Берлин Дж. А., Флори Дж., Роуман К. Г., Брунелли С. М.: Влияние L-карнитина на гипотензию, связанную с диализом, и мышечные судороги: метаанализ.Am J Kidney Dis 2008; 52: 962-971.
Indiveri C, Iacobazzi V, Tonazzi A, Giangregorio N, Infantino V, Convertini P, Console L, Palmieri F: митохондриальный носитель карнитина / ацилкарнитина: функция, структура и физиопатология. Мол Аспект Мед 2011; 32: 223-233.
Эванс AM: Связанное с диализом карнитиновое расстройство и фармакология левокарнитина.Am J Kidney Dis, 2003; 41: 13-26.
Reuter SE, Faull RJ, Evans AM: Добавки L-карнитина в диализную популяцию: упускают ли австралийские пациенты? Нефрология (Карлтон) 2008; 13: 3-16.
Экноян Г., Латос Д., Линдберг Дж., Конференция по консенсусу по карнитину Национального фонда почек: Практические рекомендации по использованию L-карнитина при расстройстве карнитина, связанном с диализом.Конференция по консенсусу по карнитину Национального фонда почек. Am J Kidney Dis, 2003; 41: 868-876.
Bellinghieri G, Savica V, Mallamace A, Di Stefano C, Consolo F, Spagnoli LG, Villaschi S, Palmieri G, Corsi M, Maccari F: корреляция между повышенным уровнем L-карнитина в сыворотке и тканях и улучшением мышечных симптомов у пациентов, находящихся на гемодиализе.Am J Clin Nutr 1983; 38: 523-531.
Kletzmayr J, Mayer G, Legenstein E, Heinz-Peer G, Leitha T., Hörl WH, Kovarik J: Анемия и добавление карнитина у пациентов, находящихся на гемодиализе. Kidney Int Suppl 1999; 69: S93-106.
Chen Y, Abbate M, Tang L, Cai G, Gong Z, Wei R, Zhou J, Chen X: добавление L-карнитина для взрослых с терминальной стадией болезни почек, требующей поддерживающего гемодиализа: систематический обзор и метаанализ.Am J Clin Nutr 2014; 99: 408-422.
Lilien MR, Duran M, Quak JM, Frankhuisen JJ, Schröder CH: Пероральный L-карнитин не снижает потребность в эритропоэтине при педиатрическом диализе. Педиатр Нефрол 2000; 15: 17-20.
Chazot C, Blanc C, Hurot JM, Charra B, Jean G, Laurent G: Пищевые эффекты добавок карнитина у пациентов, находящихся на гемодиализе.Clin Nephrol 2003; 59: 24-30.
Калантар-Заде К., Коппле Дж. Д., Блок G, Хамфрис М. Х .: Оценка недоедания-воспаления коррелирует с заболеваемостью и смертностью у пациентов, находящихся на поддерживающем гемодиализе. Am J Kidney Dis, 2001; 38: 1251-1263.
Handelman GJ: Добавки карнитина не продемонстрировали свою эффективность у пациентов, находящихся на длительной диализной терапии.Blood Purif 2006; 24: 140-142.
Hurot JM, Cucherat M, Haugh M, Foque D: Эффекты L-канитина у пациентов на поддерживающем гемодиализе: систематический обзор. J Am Soc Nephrol 2002; 13: 708-714.
Селби Н.М., Макинтайр К.В.: Острые сердечные эффекты диализа.Semin Dial 2007; 20: 220-228.
Граната С., Далла Гасса А., Томей П., Лупо А., Заза Г.: Митохондрии: новая терапевтическая мишень при хронической болезни почек. Нутр Метаб 2015; 12:49.
Чандран М., Филлипс С.А., Чьяралди Т., Генри Р.Р .: Адипонектин: больше, чем просто еще один гормон жировых клеток? Уход за диабетом 2003; 26: 2442-2450.
Vacha GM, Giorcelli G, Siliprandi N, Corsi M: Благоприятные эффекты лечения L-карнитином на гипертриглицеридемию у пациентов, находящихся на гемодиализе: решающая роль низких уровней холестерина липопротеинов высокой плотности. Am J Clin Nutr 1983; 38: 532-540.
Debska-Slizie ?, Kawecka A, Wojnarowski K, Prajs J, Malgorzewicz S, Kunicka D, Zdrojewski Z, Walysiak-Szydłowska, Lipi ?ski J, Rutkowski B: Корреляция между плазменным карнитином, уровнями гликогенетина в крови и уровнями карнитина в мышцах пациенты.Int J Artif Organs 2000; 23: 90-96.
Весела Э., Ракек Дж., Трефил Л., Янкович В., Пойер М.: Эффект приема L-карнитина у пациентов, находящихся на гемодиализе. Нефрон 2001; 88: 218-223.
Наини А.Е., Садеги М., Мортазави М., Могхадаси М., Харанди А.А.: Пероральные добавки карнитина при дислипидемии у пациентов с хроническим гемодиализом.Saudi J Kidney Dis Transpl 2012; 23: 484-498.
Wanner C, Wieland H, Wackerle B, Boeckle H, Schollmeyer P, Horl WH: Кетогенные и антикетогенные эффекты L-карнитина у пациентов, находящихся на гемодиализе. Kidney Int Suppl 1989; 27: S264-268.
Калантар-Заде К., Родригес Р.А., Хамфрис М.Х.Связь между ферритином сыворотки и показателями воспаления, питания и железа у пациентов, находящихся на гемодиализе. Дифференциальная трансплантация нефрола 2004 г .; 19: 141-149.
Калантар-Заде К., Блок G, Хамфрис М.Х., Коппл Дж. Д.: Обратная эпидемиология факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний у пациентов на поддерживающем диализе.Kidney Int 2003; 63: 793-808.
Салахудин АК: Ожирение и выживаемость на диализе. Am J Kidney Dis, 2003; 41: 925-932.
Загер П.Г., Николич Дж., Браун Р.Х., Кэмпбелл М.А., Хант В.С., Петерсон Д., Ван Стоун Дж., Леви А., Мейер К.Б., Клаг М.Дж., Джонсон Г.К., Кларк Е., Сэдлер Дж.Х., Тередесай П.: ассоциация U-образной кривой крови. давление и смертность у пациентов, находящихся на гемодиализе.Kidney Int 1998; 54: 561-569.
Nishizawa Y, Shoji T., Ishimura E, Inaba M, Morii H: Парадокс факторов риска сердечно-сосудистой смертности при уремии: лучше ли более высокий уровень холестерина для атеросклероза при уремии? Am J Kidney Dis, 2001; 38: S4-7.
Fleischmann EH, Bower JD, Salahudeen AK: Парадокс факторов риска при гемодиализе: лучшее питание как частичное объяснение.ASAIO J 2001; 47: 74-81.
Калантар-Заде К., Эбботт К.С., Салахудин А.К., Килпатрик Р.Д., Хорвич ТБ: выживаемость при ожирении у диализных пациентов. Am J Clin Nutr 2005; 81: 543-554.
Стефан Н., Артунч Ф., Хейне Н., Мачанн Дж., Шлейхер Э.Д., Херинг Х.У .: Ожирение и заболевание почек: не все жиры одинаковы, и не все ожирения вредны для почек.Трансплантат Nephrol Dial 2016; 31: 726-730.
Автор Контакты
Проф. Николина Басич-Юкич, доктор медицинских наук
Отделение нефрологии, артериальной гипертензии, диализа и трансплантации, Университетский госпитальный центр
Загреб, Медицинский факультет Загребского университета и Медицинский факультет Осиекского университета, Киспатицева 12, 10000 Загреб (Хорватия),
Тел.+ 385-1-2367-177, электронная почта [email protected]
Подробности статьи / публикации
Предварительный просмотр первой страницы
Поступила: 11 декабря 2017 г.
Дата принятия: 5 июля 2018 г.
Опубликована онлайн: 17 июля 2018 г.
Дата выпуска: октябрь 2018 г.
Количество страниц для печати: 8
Количество фигур: 3
Количество столов: 3
ISSN: 1420-4096 (печатный)
eISSN: 1423-0143 (онлайн)
Для дополнительной информации: https: // www.karger.com/KBR
Лицензия открытого доступа / Дозировка лекарства / Отказ от ответственности
Эта статья находится под международной лицензией Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 (CC BY-NC-ND). Использование и распространение в коммерческих целях, а также любое распространение измененных материалов требует письменного разрешения. Дозировка лекарств: авторы и издатель приложили все усилия, чтобы гарантировать, что выбор и дозировка лекарств, указанные в этом тексте, соответствуют текущим рекомендациям и практике на момент публикации.Тем не менее, ввиду продолжающихся исследований, изменений в правительственных постановлениях и постоянного потока информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на них, читателю настоятельно рекомендуется проверять листок-вкладыш для каждого препарата на предмет любых изменений показаний и дозировки, а также дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендованным агентом является новое и / или редко применяемое лекарство. Отказ от ответственности: утверждения, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и соавторам, а не издателям и редакторам.Появление в публикации рекламы и / или ссылок на продукты не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности. Издатель и редактор (-ы) не несут ответственности за любой ущерб, причиненный людям или имуществу в результате любых идей, методов, инструкций или продуктов, упомянутых в контенте или рекламе.
Метаболическая сигнатура в прилежащем ядре для антидепрессантных эффектов ацетил-L-карнитина
Рецензент № 1:
[…] 1) Влияние лечения LAC на депрессивное поведение у доминирующих и подчиненных мышей.Хотя размер выборки данных невелик (n = 6-7), эксперименты смогли воспроизвести предсказуемость социального статуса на основе фенотипа тревожности и уязвимости доминирующих мышей к индуцированным хроническим стрессом депрессивно-подобным дефицитам. как социальное избегание (рис. 1). Интересно, что они не смогли увидеть базальную разницу в латентном периоде до неподвижности в тесте принудительного плавания между доминантными и подчиненными самцами мышей, о которых сообщали ранее опубликованные данные (Horii et al., 2017).Тем не менее, тенденция между условиями контроля, CRS и CRS + LAC одинакова для доминирующих и подчиненных самцов, поскольку снижение% неподвижности, по-видимому, одинаково для CRS и CRS + LAC доминантной и подчиненной групп. Если авторы желают сообщить о своих выводах о влиянии лечения LAC на доминирующих и подчиненных мышей (как они это делают в своих результатах и разделах обсуждения), они должны провести двусторонний дисперсионный анализ с апостериорным анализом с социальным статусом и группой. condition в качестве переменных во всех их поведенческих тестах (социальное избегание, FST и сложное поведение) (рис. 2).
Мы вместе с рецензентом сообщаем, что для того, чтобы заявить о различном эффекте между мышами высокого и низкого ранга в отношении эффективности лечения LAC, необходимо наблюдение взаимодействия в поведенческих тестах. Поскольку эффект взаимодействия незначителен, мы следовали нашей установленной цели для исследования, которое заключалось / заключается в том, чтобы изучить, может ли лечение LAC предотвратить появление депрессивно-подобного поведения и метаболической дисрегуляции в NAc, вызванной CRS.
Соответственно, мы сделали эту цель более явной в тексте и указали в разделе «Результаты», что наше внимание в эксперименте LAC было сосредоточено на изучении результатов на мышах высокого ранга. Все результаты, полученные на животных низкого ранга в эксперименте LAC, были перенесены в приложения к рисункам (т.е. eLife «детские» фигурки; рисунок 5 — приложение к рисунку 1). Все предыдущие ссылки на сравнение эффектов лечения LAC у животных высокого и низкого рангов были удалены из текста.
2) Более того, видя, что добавление LAC, по-видимому, снижает% совокупного прироста веса и% неподвижности подвергшихся стрессу мышей, можно утверждать, что эффект LAC может быть вызван увеличением двигательной активности мышей, которая, с одной стороны, может рассматриваться как лечение подавленной двигательной активности, но, с другой стороны, может также ограничивать терапевтический потенциал добавок митохондриального стимулирования. Хотя Лау и его коллеги (2017) не обнаружили влияния LAC на неподвижность у мышей без стресса, и не следует ожидать эффекта в экспериментах, представленных в этой статье, я бы посоветовал авторам предоставить график с общим пройденным расстоянием за FST в качестве дополнительного показателя для исключения моторных эффектов LAC или дополнительной обработки после испытания в открытом поле.
Чтобы учесть озабоченность рецензента и оценить потенциальное влияние лечения на общую передвижение животных, мы измерили расстояние, пройденное мышами в тесте социального взаимодействия (измерение в FST дает такие же, хотя и обратные, результаты, как и предоставленные на рисунке 2E). Двигательная активность увеличивалась с помощью CRS, и CRS + LAC существенно не отличались по локомоции от CRS, хотя они имели тенденцию меньше двигаться, когда целевое животное отсутствовало (рис. 2G).Во всяком случае, мыши, получавшие LAC, имели тенденцию двигаться немного меньше, чем мыши, получавшие CRS и не получавшие LAC, подтверждая идею о том, что снижение плавучести, вызванное лечением LAC, у мышей, получавших CRS, в FST не объясняется общим увеличением двигательной активности. вызванный лечением.
3) Что касается введения дозы LAC, авторы сообщают, что использовали добавки с питьевой водой с концентрацией 0,3%. Однако неясно, были ли во время введения животные выделены или размещены в группах (в группах по 4 человека, как во время совместного проживания).Если возможно, следует представить отчет о потреблении воды, чтобы указать точную дозировку добавки на животное.
Мы разъяснили этот момент в разделе «Материалы и методы» следующим образом:
«Во время лечения LAC использовался один флакон на клетку из 4 мышей. Потребление жидкости контролировали каждый день и анализировали после нормализации в соответствии с массой тела 4 животных в клетке ».
Отчет о водозаборе описан в разделе «Результат» следующим образом:
«Животные, подвергшиеся воздействию CRS, продемонстрировали значительное снижение совокупного прироста массы тела, независимо от их социального статуса, чему не нейтрализовало добавление LAC (рис. 2B; высокий рейтинг: эффект стресса F _2,10 = 45.0, p <0,0001 и фиг. 2 - дополнение к рисунку 1А; в низком рейтинге: Стресс-эффект F _2,10 = 20,4, p <0,001). Важно отметить, что в то время как стресс приводил к увеличению потребления жидкости (+15 ± 12%) в стрессовых группах (Рисунок 2C и Рисунок 2 - приложение к рисунку 1B), не было разницы в потреблении жидкости между группами CRS и CRS + LAC ( Рисунок 2C) ».
Со статистикой, описанной в легенде рисунка, следующим образом:
“Рисунок 2 (C) Суточное потребление воды в течение периода лечения LAC (приведенное в течение последней недели протокола CRS), нормализованное по общей массе тела 4 мышей на клетку (групповой эффект: F2,4 = 17.0, * P <0,05; Взаимодействие: F14,28 = 0,90, P> 0,05; временной эффект: F7,14 = 1,24, P> 0,05, двухфакторный дисперсионный анализ с повторными измерениями; n = 3 клетки на группу). Таким образом, данные о водозаборе представляют собой среднее значение по садку ».
4) Изменения метаболитов NAc в ответ на хронический стресс и добавление LAC
Использование in vivo H-MRS позволяет одновременно исследовать несколько метаболитов и нейрохимических соединений у доминирующих и подчиненных самцов, которые, как известно, затрагивают процессы LAC, такие как бетация митохондрий, ацетилирование белков, перекисное окисление липидов и состав нейротрансмиттеров.Согласно их результатам, хронический стресс у доминирующих мышей влияет на различные метаболиты, связанные с митохондриальным транспортом и глутаматергической нейротрансмиссией.
Интересно, что они наблюдали снижение уровня таурина в группе с преобладанием CRS, которое было восстановлено до контрольных уровней при добавлении LAC (рис. 5). Хотя авторы обсуждают отрицательную корреляцию между уровнем таурина NAc и такими качествами, как тревожность и неподвижность, они не обсуждают удивительную природу своих результатов.Таурин — это транспортный белок митохондрий, который участвует в окислительном стрессе и обычно увеличивается в ситуациях, требующих высокой митохондриальной активности, таких как хронический сдерживающий стресс, и снижается при гипергликемии. Однако в этих результатах CRS снижает уровень таурина без изменения уровня глюкозы. Более того, это наблюдается только у доминирующих самцов. Рекомендуется более глубокое обсуждение этих результатов, чтобы подчеркнуть важность результатов, касающихся изменений таурина.
Мы благодарим рецензента за поднятие этой механистической точки зрения.Действительно, вызванная стрессом гипергликемия во время ежедневного стрессового воздействия могла способствовать наблюдаемым изменениям уровня таурина NAc. Соответственно, более низкие уровни таурина NAc, обнаруженные у подвергнутых стрессу мышей высокого ранга, теперь дополнительно рассматриваются в отношении гипергликемии путем включения следующего абзаца в раздел «Обсуждение»:
«Таурин представляет собой серусодержащую аминокислоту, не участвующую в синтезе белка, но с несколькими функциями, включая антиоксидант, сигнальную молекулу и осмолит (Hansen et al., 2006; Ян и др., 2013; Wang et al., 2016; Джамшидзаде и др., 2017). Было показано, что концентрация таурина в мозге снижается при хроническом стрессе (Barbosa Neto et al., 2012) и гипергликемических состояниях (Malone et al., 2008). […] Будет важно выяснить, является ли это механизмом, который приводит к снижению уровня таурина в прилежащей области, наблюдаемому в нашем исследовании ».
Что касается влияния хронического стресса на функцию митохондрий, учитывая, что существуют специфические различия в областях мозга, которые обычно встречаются в литературе, мы предпочли бы не включать этот аспект до его тщательного рассмотрения в будущих исследованиях для ясности сообщения и обсуждения. .
5) Что касается основных эффектов LAC в коррекции дефектов метаболитов, связанных с митохондриями, был бы уместен дополнительный эксперимент по измерению активности комплекса I-II в NAc (после экспериментов соответствующего автора в Hollis et al., 2015). чтобы поддержать выводы.
Хотя измерение митохондриального дыхания для комплексов I и II, как в Hollis et al., 2015, может дать дополнительную информацию о том, влияет ли лечение конкретно на функцию митохондрий, и мы согласны с самим по себе интересом, мы хотели бы рассмотреть эти и несколько других потенциальных механизмов, связанных с митохондриями и ER, и их взаимодействия в контексте стресса и пищевых добавок, таких как LAC, в будущих исследованиях, которые углубят понимание механизмов.На данный момент, учитывая длительные вложения, которые потребуются для такого эксперимента, мы сделали выбор, сосредоточив внимание на метаболической характеристике метаболитов, которую можно количественно оценить с помощью ¹ H-MRS, чтобы продвинуться по потенциальным конечным точкам и биомаркерам, которые могут также будут продолжены в исследованиях на людях. Поэтому, надеясь, что рецензенты и редакторы согласны, а также из-за фактического отсутствия времени на проведение такого длительного эксперимента с запрошенной редакцией, мы решили этот момент, включив следующий комментарий в раздел «Обсуждение»:
«Будет важно выяснить, является ли это механизмом, который приводит к снижению уровней таурина в прилежащей области, наблюдаемым в нашем исследовании, а также изучить, как изменения метаболитов, вызванные стрессом и LAC, связаны с функцией митохондрий.”
Рецензент № 2:
[…] 1) Даже после того, как я несколько раз прочитал эту рукопись (и предыдущую статью Current Biology 2017), я все еще борюсь с используемой номенклатурой, то есть доминирующей и подчиненной, и с тем, как оценивается индивидуальный ранг. Ниже приведены некоторые опасения по этому поводу и общая рекомендация использовать другую номенклатуру и избегать интерпретации данных в пользу различий в социальном статусе.
— Мне до сих пор неясно, что на самом деле измеряет рис. 1С и как рассчитывался индекс доминирования (рис. 1В).[…] Ниже я привожу несколько альтернативных (умозрительных) интерпретаций: i) большое время, проведенное в трубке, подразумевает расширенную социальную принадлежность между двумя мышами, а не социальную конфронтацию; ii) низкое времяпрепровождение подразумевает высокий страх перед трубкой как таковой, независимо от присутствия партнера; iii) время настаивает на усилении реакции страха, проявляющейся в застывании / неподвижности, опять же независимо от социального взаимодействия.
— Вывод о том, что ранг в пробирке эквивалентен социальному рангу, не подтвержден поведенческими наблюдениями за агонистическим взаимодействием в домашней клетке.Мышей поместили на 5 недель перед тестом в пробирке, чтобы «дать достаточно времени для стабилизации социальной иерархии». Однако нет данных об агонистических взаимодействиях и социальном статусе в домашней клетке. Как они узнают, что иерархия в домашней клетке отражается в ранге в пробирке? Опыт с B6 показывает, что очень часто иерархия не настолько линейна, как можно предположить из ранга пробирки.
— То, как «доминирующий» и «подчиненный» определяются в рукописи, методологически касается (сравнение рангов 1 + 2 с рангами 3 + 4 эквивалентно срединному разделению населения; сомнительный аналитический подход) и биологически неясно (что Актуальность группировки 1/2 и 3/4 для социобиологии мышей, которые, как известно, являются крайне деспотическими? Классическая статья https: // Academic.oup.com/jmammal/article/36/2/299/960816).
— Авторы должны также рассмотреть и обсудить результаты этого исследования (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5920077/), в котором использовался аналогичный протокол тестирования пробирок (а также их обзор соответствующая литература).
— В целом, я настоятельно рекомендую избегать определения «доминирующий» и «подчиненный» в рукописи и анализировать их очень хорошие данные в соответствии с более нейтральными «высоким рангом» и «низким рангом» в пробирке (или даже лучше сравнить 4 ранга по отдельности, т.е.грамм. альфа, бета и т. д.) и попытайтесь определить или, по крайней мере, предположить, что на самом деле означает этот ранг. Как они и другие продемонстрировали, есть очень интересная биология, связанная с рангом, оцениваемым в этом тесте. Он четко отражает индивидуальную черту (например, похожую на тревожность, измеряемую в EPF?), Которая может быть связана или не связана с социальным статусом или социальным рангом. Действительно, существует обширная литература, показывающая, что, когда социальный ранг оценивается с помощью поведенческих наблюдений за социальным взаимодействием, подчиненные мыши проявляют более высокую тревожность и поведение, подобное депрессии, по сравнению с доминирующими мышами, что противоположно результатам, когда ранги оцениваются в пробирке. (Рисунок 1).
В комментариях рецензента 2 есть несколько моментов:
1) Как измеряется индекс социального доминирования. Чтобы лучше объяснить это, мы добавили следующие предложения в соответствующую часть раздела «Материалы и методы»:
«Определение победителя после каждой из 6 возможных пар противостояний на клетку позволяло ранжировать каждую мышь по времени ее выигрыша в диапазоне от 0 до 3. […] Чтобы отразить специфику наблюдаемого доминирующего и подчиненного поведения в SCTT (Varholick et al., 2018), животные с наивысшим индексом доминирования (ранги 1 и 2) упоминаются здесь как «высокие ранги», а животные с самым низким индексом доминирования (ранги 3 и 4) называются «низкими рангами» ».
2) Достоверность теста трубки социального противостояния для индексации социальной иерархии людей в домашней клетке. Хотя возможные различные объяснения поведения мышей в этом тесте, предложенные рецензентом, безусловно, верны, наши экспериментальные условия были выбраны так, чтобы минимизировать двусмысленность в интерпретации данных.Обратите внимание, что, как указал обозреватель, мышей содержали вместе не менее 5 недель перед проведением теста в пробирке. Это очень важно, как также указано в одной из ссылок, предоставленных рецензентом (см. Выше: Varholick JA, Bailoo JD, Palme R and Würbel H, Sci. Rep.2018, Фенотипическая изменчивость между рангами социального доминирования у лабораторных мышей — doi : 10.1038 / s41598-018-24624-4), когда они тестировали динамику иерархии мышей на протяжении всего времени с момента первого создания колонии домашней клетки, они «обнаружили, что ранги доминирования большинства мышей менялись со временем, но были наиболее стабильными между 2-м и 3-м. неделя тестирования ».
В нашем предыдущем исследовании (Larrieu et al., 2017) мы также подтвердили, что измеренная иерархия была стабильной во времени, и также установили, что она следовала линейному шаблону (см. Изображение ответа автора 1).
Кроме того, наш выбор этого экспериментального подхода основан на тщательном рассмотрении валидации этого теста в литературе — см., Например, следующий список статей, опубликованных по методологическим аспектам или пересмотру валидности теста на всем протяжении опубликованные данные:
Fan Z, Zhu H, Zhou T, Wang S, Wu Y, Hu H.Использование пробирки для измерения социальной иерархии у мышей. Nat Protoc. 2019 Март; 14 (3): 819-831. DOI: 10.1038 / s41596-018-0116-4. PMID: 30770887.
Ван Ф., Кессельс Х. В., Ху Х. Мышь, которая ревела: нейронные механизмы социальной иерархии. Trends Neurosci. 2014 ноя; 37 (11): 674-82. DOI: 10.1016 / j.tins.2014.07.005. Рассмотрение. PMID: 25160682
3) Перекрестная проверка результатов теста трубки с другими конфронтационными тестами. Как и в (Wang et al., 2014), мы также ранее подтвердили, что совместное проживание тетрад в домашней клетке для соответствующих изменений в поведении доминирования в других тестах (например,g., агонистическое / боевое поведение и тест на маркировку мочи) — см. изображение ответа автора 1. Кроме того, недавно также использовался тест с подогревом для подтверждения результатов ранжирования результатов теста пробирки (см. Zhou et al., 2017).
См. Изображение ответа автора 1 с перекрестной проверкой наших текущих экспериментальных условий (не менее 5 недель совместного проживания в домашней клетке), как опубликовано в нашем исследовании (Larrieu et al., 2017). При вычислении показателя доминирования, включающего несколько параметров покорности или нападения (бегство, избегание, замирание, покорная поза; преследующая атака, включая укус, вертикальная и боковая наступательная поза), мы показали, что мыши высокого ранга (1-2) имеют значительно более высокое доминирование. оценка по сравнению с низким рейтингом (3-4).
Иерархический ранг с помощью теста на социальную конфронтацию.
( A ) Иллюстрация общего графика исследования. ( B ) Пример одной клетки, представляющей ранги испытаний пробирок и время выигрыша в зависимости от испытаний пробирок. ( C ) Резюме для девяти клеток за 6-дневные испытания.( D ) Время, проведенное в трубке ( с ), как функция ранжирования пары (F5,48 = 9,78, p <0,001, односторонний дисперсионный анализ; ∗∗ p <0,01, ∗∗∗ p <0,001 , Критерий Бонферрони, n = 9 на ранговую пару). ( E ) Оценка доминирования после агонистического поведения в домашней клетке (t28 = 2,30, ∗ p <0,05, непарный t-критерий, двусторонний n = 15 на группу). ( F ) Таблица сопряженности 2 × 2 для корреляции между агонистическим поведением и оценками пробирки (точный тест Фишера, двусторонний, p = 0.050). ( G ) Слева: изображение, представляющее типичный профиль следов мочи доминирующих и подчиненных мышей, выявленных источником ультрафиолетового света. Справа: таблица сопряженности 2 × 2 для корреляции между оценками теста мочи и пробирками (точный тест Фишера, двусторонний, p = 0,026, n = 26 пар). Из Larrieu et al., 2017, Curr Biol ..
4) Использование терминов «доминирующий» и «подчиненный». По предложению рецензента мы изменили все прежние ссылки на эти термины и заменили их, как предлагается, на «высокий рейтинг» и «низкий рейтинг».Уточнения в материалах и методах были сделаны следующим образом:
«Чтобы отразить специфичность наблюдаемого доминирующего и подчиненного поведения по отношению к SCTT (Varholick et al., 2018), животные с наивысшим индексом доминирования (ранги 1 и 2) упоминаются здесь как« высокие ранги », в то время как животные с самым низким индексом доминирования (ранги 3 и 4) называются «низкими рангами» ».
5) Кроме того, следуя рекомендации рецензента обсудить исследование Varholick et al., 2018, мы добавили в Обсуждение следующий абзац:
«Однако следует добавить предостережение, поскольку предыдущая работа предполагает, что, хотя доминантные мыши, как правило, демонстрируют больше исследовательское поведение, связанное с новизной, чем менее доминирующие мыши, различия в поведении, связанном с тревогой, кажутся менее последовательными (см. Varholick et al. , 2018, и ссылки здесь). Мы также хотели бы подчеркнуть, что мы обнаруживаем высокую надежность и линейность оценки социального ранга в наших экспериментальных условиях, которые включают не менее 5 недель сожительства до проведения теста на социальную конфронтацию (см. Также Larrieu et al., 2017). Эта характеристика может определять фенотип, отличный от исследований, в которых социальная иерархия устанавливается в течение первых 2-3 недель совместного проживания. Действительно, недавнее исследование показало, что во время раннего сожительства уровни доминирования мышей менялись при повторных измерениях, но становились более стабильными между 2-й и 3-й неделями тестирования (Varholick et al., 2018) ».
6) Наконец, рецензент спросил, как будут выглядеть результаты, если мы сосредоточимся на сравнении между рангами 1 и 4.Сравнение между рангом 1 и 4, представленное на изображении ответа автора 2, демонстрирует ту же тенденцию, что и при сравнении ранга 1-2 с рангом 3-4. Тем не менее, из-за сильного сокращения количества животных на группу при использовании этого подхода (N = 3) статистическая интерпретация должна быть осторожной. Поэтому мы решили не включать эти результаты в рукопись. Если рецензенты захотят увидеть эти результаты в рукописи, мы, конечно, пересмотрим наше предложение.
Поведенческие и метаболические сравнения между рангом 1 и рангом 4.
( A ) Сравнение параметров тревожности, измеренных с помощью приподнятого крестообразного лабиринта, когда сравниваются только наивысший ранг (R1) и самый низкий ранг (R4). T-критерий Стьюдента, n = 6-7 на группу. ( B ) Сравнение параметров тревожности, измеренных с помощью открытого поля, когда сравниваются только наивысший ранг (R1) и самый низкий ранг (R4). T-критерий Стьюдента, n = 3 на группу. ( C ) Депрессивно-подобное поведение, измеренное как составной z-балльный компонент социального избегания и времени неподвижности у животных ранга 1 (F2,6 = 2.95, P> 0,05, односторонний дисперсионный анализ; n = 3 на группу). ( D ) Депрессивно-подобное поведение, измеренное как составной компонент z-показателя социального избегания и времени неподвижности у животных ранга 4 (F2,6 = 0,07, P> 0,05, однофакторный дисперсионный анализ; n = 3 на группу ). ( E ) Нейрохимия Accumbal у мышей 1-го ранга. Односторонний дисперсионный анализ, тест Бонферрони, n = 3 на группу. ( F ) Нейрохимия Accumbal у мышей 4-го ранга. Односторонний дисперсионный анализ, тест Бонферрони, n = 3 на группу.
2) Рисунок 2.Лечение LAC значительно улучшило неподвижность, вызванную стрессом (хотя процентное изменение невелико), но не оказало никакого эффекта в тесте на социальное взаимодействие. Поэтому авторам следует быть очень осторожными в использовании резких заявлений об «антидепрессивном» эффекте этого препарата.
Мы действительно смягчили текст в соответствии с комментариями рецензента. Обратите внимание, однако, что мы также обнаружили различия в композитном z-балле для двух поведенческих тестов, что указывает на то, что в целом CRS увеличивает изменения в этих эмоциональных тестах, а LAC — наоборот.
3) Я не вижу особой пользы в использовании сводной поведенческой оценки всего двух тестов, из которых только один показывает значительную разницу между группами. По сути, счет будет определяться FST. Если авторы не смогут дать убедительное обоснование его значимости, этот балл следует удалить.
Несмотря на то, что мы ценим комментарий рецензента, совокупная оценка позволяет получить более общую картину того, как отдельные животные страдают при тестировании с помощью двух использованных поведенческих тестов.Следовательно, это измерение имеет более высокую значимость, чем оценка отдельных тестов по отдельности, и поэтому, если это не является серьезным препятствием с точки зрения рецензента, мы предпочли бы оставить его в статье.
4) Рисунок 1F; укажите фактическое общее время в зоне взаимодействия и в углах.
Время в зоне взаимодействия и в углах теперь добавлено на рис. 1F.
“Рисунок 1: (F) […] Время в зоне взаимодействия: Взаимодействие: F _1,21 = 12.80, P <0,005; эффект ранга: F _1,21 = 0,85, P <0,05; стрессовое воздействие: F _1,21 = 12,21, P <0,005, двухфакторный дисперсионный анализ; p * <0,05, ** p <0,005, тест Бонферрони, n = 6-7 на группу / Время в угловой зоне: Взаимодействие: F _1,21 = 3,29, P> 0,05; эффект ранга: F _1,21 = 0,28, P <0,05; стрессовый эффект: F _1,21 = 2,14, P> 0,05, двусторонний дисперсионный анализ, n = 6-7 на группу) ».
5) Рисунок 1E; Пожалуйста, укажите время в центре, время на внешнем кольце или углах и т. д.Значимость задержки входа в центр как наиболее важного показателя тревожности сомнительна.
Мы включили время в центре, а также пройденное расстояние для OF на Рисунке 1E. Эти результаты были описаны в разделе «Результаты» и в легенде на Рисунке 1 следующим образом:
«Однако две группы не показали различий в процентном соотношении времени, проведенного в центре OF (рис. 1E, в центре), что указывает на то, что их различие в поведении, похожем на тревогу, зависит от конкретной встречающейся угрозы.Важно отметить, что никакой разницы в двигательной активности не наблюдалось, поскольку расстояние, пройденное обеими группами в ОП, было одинаковым (рис. 1Е, справа; н.у.) ».
“Рисунок 1: (E) Поведение, связанное с тревогой, измеренное в открытом поле, включая задержку для первого входа в центр арены (* p <0,05, непарный t-критерий, двусторонний n = 14 на группу) и время в центральной зоне (ns непарный t-критерий, двусторонний n = 14 на группу). Двигательная активность измеряется как пройденное расстояние в OF (n.s.непарный t-критерий, двусторонний n = 14 на группу) ».
Рецензент № 3:
Авторы исследовали потенциальные антидепрессивные эффекты ацетил-L-карнитина у доминирующих и подчиненных мышей, подвергшихся хроническому стрессу ограничения. Доминирующие и подчиненные мыши были классифицированы на основе их иерархического статуса. После хронического стресса доминирующие мыши проявляют уязвимость в социальном взаимодействии и в тесте принудительного плавания. Лечение карнитином устранило дефицит, наблюдаемый в тесте на плавание Порсолта, но не отказался от общества.Затем авторы использовали MRS и определили в NAc некоторые метаболиты, которые уменьшаются под действием стресса и восстанавливаются карнитином. Некоторые из этих метаболитов связаны с функцией митохондрий. Несмотря на корреляцию, этот подход к открытию определенно имеет некоторые достоинства, поскольку он определил некоторые цели в NAc, за которыми можно было бы продолжить функциональные исследования в надежде, что они играют важную роль в депрессии. Хотя нам понравилась эта работа, у нас все еще есть несколько серьезных проблем, которые авторы должны решить:
1) Авторы слишком полагаются на тест принудительного плавания, чтобы продемонстрировать, что L-карнитин является антидепрессантом.Как, вероятно, знают авторы, этот поведенческий тест в последнее время получил много критики и определенно не является тестом на депрессию. Чтобы усилить эту рукопись, необходимо добавить больше поведенческих тестов — могут быть тесты, требующие энергии и совладания.
Мы благодарим рецензента за этот комментарий, и, по сути, мы используем этот тест, учитывая его способность различать активные и пассивные реакции совладания со стрессовой ситуацией. Мы понимаем эту точку зрения и будем стремиться увеличить количество тестов в наших будущих исследованиях.
2) Данные EPM, показанные на рисунке 1: Животные в этом тесте проводят 4-8% своего времени в открытых руках. Это чрезвычайно малое время, которое не позволит экспериментаторам оценить эффекты анксиогенного лечения.
Спасибо за этот комментарий. Учитывая нормальные межэкспериментальные вариации (по крайней мере, в наших руках), процент времени в открытых руках в этом исследовании был немного (хотя и незначительно отличался) ниже, чем результаты в других исследованиях в лаборатории (см.g., наш Larrieu et al., 2017, Curr Biol. Бумага). Поскольку цель этого теста в нашем исследовании состояла в том, чтобы охарактеризовать базальное тревожное поведение у животных высокого и низкого ранга, этот момент не вызывает проблем с точки зрения потенциальных методов лечения, но мы благодарим рецензента за указание на проблему и будем стремиться изменить экспериментальную Условия, чтобы сделать тест менее тревожным, когда мы стремимся изучить, как конкретное лечение может изменить тревожное поведение у мышей.
3) Данные OF, показанные на рисунке 1: почему сообщается только задержка для входа в центр? Обычно
сообщает о времени, проведенном в центре ОФ.
Спасибо за этот комментарий, теперь мы включили эти результаты на рис. 1E и представили новые данные в разделе результатов.
4) Почему 2-й ранг считался доминирующим? Если это так, ранг 3 также доминирует над рангом 4, верно? Подумали ли авторы об изучении только крайностей (ранг 1 против ранга 4)?
Как упоминалось ранее, учитывая небольшое количество животных в нашем исследовании, сравнение между рангом 1 и рангом 4 было затруднительным. Мы проверили, существует ли значительная разница между рангом 1 и рангом 4 в различных параметрах измерений базовой тревожности (OF и EPM) и пост-CRS (депрессивно-подобное поведение и прилежащие метаболиты).Хотя тенденция была аналогичной, как при включении ранга 1-2 против ранга 3-4, статистический тест (t-критерий Стьюдента или однофакторный дисперсионный анализ с апостериорным методом) не прошел порог значимости из-за уменьшения статистических данных. силы, но обнадеживают, что наша группировка животных в животных высокого и низкого ранга отражает изменения, наблюдаемые в рангах 1 против 4, а именно:
[Примечание редакции: до принятия были предложены дальнейшие исправления, как описано ниже.]
Рукопись была улучшена, но есть некоторые оставшиеся проблемы, которые необходимо решить до принятия, как указано ниже.
1) В то время как авторы изменили номенклатуру с dom / sub на высокий / низкий ранг в разделе результатов / рисунках, интерпретация того, что отражает этот ранг, осталась неизменной в аннотации, введении и большей части обсуждения. Как сейчас написано, роль статуса / ранга в наблюдаемом фенотипе сбивает с толку. Если авторы считают социальный ранг чертой (генетически закодированной?), А не состоянием, они должны быть последовательны в рукописи.
Мы изменили это в тексте:
Резюме: теперь мы включаем следующее предложение и формулировку:
«Мыши высокого, но не низкого ранга, по оценке с помощью пробирки,….”
Результат: теперь мы включаем следующую формулировку:
поведенческий фенотип мышей высокого и низкого рангов »(по оценке путем тестирования 4 мышей из одной и той же домашней клетки в тесте на социальную конфронтацию)»,
Мы также добавили «мышей высокого (ранги 1 и 2) и низкого (ранги 3 и 4) ранга»
В обсуждение мы добавили следующее предложение:
«Животные высокого ранга были определены как животные, которые после сожительства в группах по 4 самца получили ранги 1 и 2 в тесте на социальную конфронтацию.”
2) Авторы не обращали внимания на главную проблему: группы с высоким и низким рангом просто отражают медианное разделение населения. Визуальный осмотр рисунка 1 показывает, что ранги 2 и 3 очень похожи, практически неотличимы друг от друга. Поскольку N низкий, они не могли анализировать каждый ранг отдельно, а ранг 1 и ранг 4 статистически не различаются (изображения ответов автора).
Мы хотели бы указать, что цифры, которые мы включили в опровержение версии R1, подтверждают различия в результатах между рангом 1 и рангом 4.Следует отметить, что в нашем отчете мы применили двустороннюю статистику; поскольку сравнения были сделаны после конкретных прогнозов, односторонняя статистика для животных ранга 1 в этих результатах дает тенденции, очень близкие к значимости (т. е. p <0,056, P <0,075, p <0,08; p <0,05; p <0,1; p <0,12; p <0,056; p <0,056), хотя они явно не значимы для мышей 4-го ранга, что дополнительно подтверждает опубликованные результаты.
Чтобы более подробно отреагировать на эту проблему от рецензента, мы добавили следующее предупреждение в раздел «Обсуждение»:
«Еще одна проблема, которую следует учитывать, заключается в том, что для нашего анализа мы сгруппировали ранги 1 и 2 как мышей высокого ранга, а ранги 3 и 4 как мышей низкого ранга.Хотя эта группировка позволяет выявить статистические различия в оцениваемых переменных, каждый из рангов в тетрадной иерархии домашней клетки может фактически привести к идиосинкразическим фенотипам. В будущем будет важно решить проблему уязвимости к стрессу для каждого конкретного ранга в колонии ».
3) Авторы не представили никаких оправданий для использования составной поведенческой оценки (за исключением удобства наличия второй меры «глобального» депрессивного поведения).
Фактически, в нашем опровержении R1 мы предоставили объяснение использования составного поведения следующим образом:
«Несмотря на то, что мы ценим комментарий рецензента, совокупная оценка позволяет получить более общую картину того, как отдельные животные страдают при тестировании с помощью двух использованных поведенческих тестов. Следовательно, это измерение имеет более высокую значимость, чем оценка отдельных тестов по отдельности, и поэтому, если это не является серьезным препятствием с точки зрения рецензента, мы предпочли бы оставить его в статье.”
В рукопись мы также включили следующее пояснение:
«Чтобы получить комплексную оценку того, как лечение стресса и LAC влияет на эмоциональное поведение в более глобальном масштабе, мы вычислили общую поведенческую композицию, чтобы интегрировать отклонение от нормального с учетом дисперсии мышей высокого ранга в обоих поведенческих тестах».
Возможно, это было недостаточно ясно, и поэтому мы добавили в текст следующие дополнительные пояснения:
«В частности, использование этого составного балла позволяет учитывать отклонения от среднего в поведении людей в двух разных поведенческих тестах, обеспечивая более надежное измерение поведения людей в тестах, которые обычно используются для индексации депрессивного поведения мышей.”
Другими словами, вычисляя поведение животных (или их отклонение от нормального / среднего значения) в поведенческих тестах, мы позволяем выявить согласованные изменения в тестах, что на самом деле является другим измерением, которое вычисляет разные поведения по отдельности; что-то, что не позволяет выявить, одинаково или по-разному воздействовали на одних и тех же животных в разных тестах; такое сложное поведение позволяет получить более глобальную картину отклонений людей при глобальном поведенческом тестировании.
Мы надеемся, что это дополнительное объяснение в рукописи и здесь, в этом опровержении R2, поможет нам убедительно обосновать, почему мы считаем, что это важное дополнительное измерение, которое необходимо добавить в рукопись.
4) Наконец, доказательства в пользу того, что мыши высокого ранга характеризуются высокой тревожностью, ограничиваются только одним поведенческим тестом, EPM.
Да, это указано в тексте, уже из нашей редакции в R1, следующим образом: «указывая, что их различие в поведении, похожем на тревожное, зависит от конкретной встречающейся угрозы».
Чтобы прояснить этот момент, мы добавили в Обсуждение следующее объяснение:
«….более высокий ранг связан с более высоким тревожным поведением, на что указывает их исследование приподнятого крестообразного лабиринта (но обратите внимание, что эти животные не отличались от низкого ранга по времени, проведенному в центре открытого поля, только по их латентному времени, чтобы войти в зона) »
Я хотел бы попросить авторов ответить на эти комментарии, тщательно обсудив сильные стороны / ограничения классификаций ранжирования доминирования.