Разогнать лимфу: Как разогнать лимфу и избавиться от целлюлита

krasota.znaju-kak.com/ym/massager-dlya-litsa.php — Массажер-гальванизатор для антивозрастного ухода за лицом С течением времени кожа неизбежно теряет эластичность, контур лица портится – это естественный, хотя и малоприятный процесс старения. Если мы заранее примем меры и постараемся приостановить старение с помощью специального ухода, мы сможем ослабить внешние признаки увядания кожи. С возрастом кожа слабеет, особенно после 30 лет, когда она становится более чувствительной. Избыток солнца, загрязнения, особенности питания и недостаток…

Как привести себя в порядок после праздников.

Откуда же возникает отечность?

 Отеки появляются оттого, что мы мало спали, много употребляли пищи, которая задерживает жидкость, меньше чем нужно выпивали воды. 

Первое, с чего нужно начать свое восстановление после нового года — это наладить питание и восстановить баланс в организме от переедания. Это не означает, что в ход идут диеты или голодание, это наоборот нанесет еще больше стресса организму. Необходимо провести небольшую разгрузку и отдых: кушаем меньше сладкого и мучного, жирного и соленого, и больше нежирного мяса, овощей, орехов, каш,творога, цельнозерновых круп. Плюс, стоит включить в рацион продукты, в которых есть калий, так как он позволяет быстро вывести лишнюю жидкость из организма. Калий содержится в бобовых, петрушке, огурцах, сельдерее, зеленом чае. Также очень важно пить много воды, т.к. наш организм обезвожен и старается удерживать жидкость. Поэтому чем больше воды дадим нашему организму, тем быстрее его функционирование придет в норму.  

Следующий шаг – добавить активность. 
Еще один фактор отечности — малоподвижный образ жизни. Поэтому как бы не хотелось нам подольше валяться, без активности в тонус не вернуться. 
Делаем утреннюю зарядку и отправляемся на прогулку по свежему морозному воздуху (не забывая увлажнять кожу). Еще один вариант –стряхнуть пыль с абонемента в тренажерный зал и постепенно входить в спортивный режим. Начните с легких нагрузок и постепенно увеличивайте интенсивность.Альтернативный вариант тренажерному залу — бассейн. Это отличная нагрузка на все группы мышц.  
Неважно, какую активность вы выберете, главное, помните: кислород и умеренные физические нагрузки — главный враг отеков. 
 
Последствия праздников отражаются не только на теле, но и лице. Появляются отеки в периорбитальной области, и лицо выглядит уставшим. 
Кожа лица тоже устает, дайте ей восстановиться, используя минимум декоративной косметики или отказавшись от неё на время.  Не забывайте и о косметологических процедурах, которые помогут вам вернуться в хорошее самочувствие: микротоки, лимфодренажный масаж лица и тела помогут справиться с отеками, а пилинги, маски, уходовые и очищающие программы вернут лицу естественный цвет. 
 
Каким еще способом можно устранить отеки?

Например, с помощью массажа – это прекрасный способ разогнать лимфу и избавиться от отеков. А также контрастный душ поможет вам взбодриться с утра: организм воспринимает резкий перепад температур как экстремальные обстоятельства и мобилизует внутренние процессы, при этом усиливается кровообращение в тканях, уходят отеки и стимулируется обмен веществ. Кожа тонизируется, приобретает здоровый оттенок. 

Картирование лимфатических сосудов и мониторинг прогрессирования лимфедемы

На фото выше: устройство для лимфографии с индоцианиновым зеленым (ICG) (Photodynamic Eye, Hamamatsu Photonics K.K, Япония). Небольшое компактное устройство может визуализировать лимфатические сосуды с помощью инъекции индикатора.

Гостевой блог доктора Хиро Суами и Луизы Кельмейер. Это 12-минутное чтение.

Вы знакомы с лимфографией индоцианинового зеленого (ICG)? Этот инновационный метод картирования лимфатической системы стал чрезвычайно важным в области исследования и лечения лимфедемы.

В этой статье два всемирно известных эксперта по лимфедеме поделятся своими мыслями об ICG и о том, как он помогает нам понимать и контролировать лимфатические сосуды. Во-первых, д-р Хиро Суами описывает свое прошлое с лимфедемой и то, как он использовал устройство ICG. После этого Луиза Кельмейер поделится своим мнением об использовании ICG в программе ALERT на факультете медицины, здоровья и гуманитарных наук Университета Маккуори в Австралии.

Устройство для лимфографии с индоцианином зеленым (ICG) (Photodynamic Eye, Hamamatsu Photonics K.К., Япония). Небольшое компактное устройство может визуализировать лимфатические сосуды с помощью инъекции индикатора.

Д-р Хироо Суами: Обнаружение и картирование лимфатических сосудов

Я пришел изучать лимфатические процессы через библиотеки, изучая очень старые книги. Многие люди не осознают, что большая часть наших знаний о лимфатической системе основана на информации, возраст которой не менее 100 лет.

Тем не менее, несмотря на то, что у нас есть долгая письменная история, касающаяся лимфатических сосудов, когда я показывал коллегам то, что было в этих старых книгах, они не сразу узнали это.Их знакомство с лимфатической системой было довольно ограниченным, и многие из них фактически не понимали, как выглядят лимфатические сосуды.

После более чем десятилетней работы реконструктивным микрохирургом в 2009 году я поступил в отделение пластической хирургии онкологического центра доктора медицины Андерсона в Хьюстоне, штат Техас. Я участвовал в операционном центре пластической хирургии, где я помог с процедурами лимфедемы более чем 250 пациентам. Мне стало ясно, что одной из распространенных проблем в хирургии было то, что даже у превосходных хирургов не было надежного способа нанести на карту точное расположение лимфатических сосудов.

Например, посмотрите на процедуру, называемую лимфатико-венозным анастомозом, известную как LVA, при которой обнаруживается лимфатический сосуд и создается шунт в вену на дистальной стороне конечности. В этой концепции нет ничего нового, и американский пластический хирург опробовал эту операцию на животном в 1960-х годах. В 1970-х годах австралийский пластический хирург провел серию клинических испытаний, но хирургу всегда было трудно точно определить местонахождение лимфатических сосудов.

С помощью устройства лимфографии с индоцианином зеленым (ICG) лимфатические сосуды освещаются, и их очень легко увидеть на карте по всему телу.Эта технология включает камеру, которая похожа на очки ночного видения, светящиеся инфракрасной картой. Конечно, на самом деле это не очки — это камера, которая собирает информацию и отображает изображение на мониторе, но концепция аналогична. Как вы понимаете, это может быть очень полезно во время операции.

В 2015 году я покинул Хьюстон, чтобы поехать в Австралию и работать с Луизой Кельмейер, менеджером программы по лимфедеме программы ALERT на факультете медицины, здравоохранения и гуманитарных наук Университета Маккуори. На этом этапе я хотел бы познакомить вас с Луизой, которая поделится своими мыслями о проактивном подходе к наблюдению за пациентами, подверженными риску развития лимфедемы.

Изображение: Доктор Суами управляет устройством ICG в операционной перед операцией LVA пациенту с лимфедемой руки.

Луиза Кёльмейер: Наблюдение за нашими пациентами на предмет лимфедемы

Во-первых, я хотел бы немного рассказать о нашей программе в Университете Маккуори. ALERT означает Австралийскую программу обучения, исследований и лечения лимфедемы, которая представляет собой комплексную междисциплинарную программу университета, которая работает, чтобы предложить положительные результаты для тех, кто подвержен риску или живет с лимфедемой.Наша программа довольно молодая и была основана в 2012 году под руководством профессора Джона Бояджа, специалиста по раку груди и онколога-радиолога.

Три миссии факультета: лечить, учиться и открывать. «Heal» — это наше лечебное подразделение программы ALERT, в котором терапевты по лимфедеме, специалисты по реабилитации и пластические хирурги объединяются, чтобы предложить междисциплинарные оценки и лечение во всех аспектах консервативного и хирургического лечения лимфедемы. Мы предлагаем операцию липосакции при запущенной лимфедеме, а также внедрили устройство ICG в лимфатические микрохирургии, включая операции LVA и LNT (перенос лимфатических узлов).

Для «обучающей» части нашей миссии мы разработали трансформирующий опыт обучения для медицинских работников, желающих специализироваться в области лимфедемы. Мы разработали аккредитованные образовательные программы по лимфедеме, обогащенные последними исследованиями и отличным клиническим уходом, проводимым в нашей среде.Медицинские работники могут пройти обучение по специальности «лимфедема», а затем продолжить свое профессиональное обучение, выполнив предложения НПР на основе передовых навыков. Мы видим себя центром передового опыта в области образования, исследований и лечения лимфедемы.

Что касается «открытий», мы постоянно работаем с людьми со всего мира, чтобы накопить наш опыт в исследованиях лимфедемы, и участвовали в международных рандомизированных контролируемых исследованиях, а также в исследованиях домашних исследователей. Мы начинаем завоевывать международную репутацию.

В течение почти 1000 оценок ICG за последние 3 года, проведенных доктором Суами и нашей многопрофильной командой ALERT, наши методы изменились с течением времени, и наш опыт вырос. Техника MLD (массажа), а также давление и скорость, которые мы используем, изменились из-за использования ICG.

Для пациентов самым большим изменением в использовании ICG является то, что они получают индивидуальный подход к своей собственной консервативной терапии. Ранее мы рекомендовали всем пациентам использовать одинаковый подход.Все может быть массировано вниз по одной стороне тела или в определенных областях лимфатических узлов.

До операции по поводу рака груди все морфология в основном была одинаковой. Человеку, который не перенес операцию, имеет смысл порекомендовать ту же форму лимфатического дренажа, которую получал бы любой другой. Но операция вызывает изменения в организме. Лимфатические сосуды в груди и руке могут начать работать по-другому. После операции каждый человек имеет уникальное тело, и его маршрут лимфодренажа может измениться — карта их тела, по которой будет следовать дренаж, также должна быть уникальной.

Теперь с помощью блока ICG пациент получает индивидуальные рекомендации по лечению. Мы учим пациента и его терапевта дренировать таким образом, чтобы это отвечало их личным потребностям и приносило наибольшую пользу их организму. Это более целенаправленный подход, который предотвращает напрасную трату времени и не обязательно приносит пользу отдельному пациенту, но ранее был просто общей рекомендацией, которой следовало бы большинство клиницистов в соответствии с их подготовкой. В результате мы получаем отличные результаты.

Однако я признаю, что это отход от стандартной методики обучения и лечения. Для некоторых из вас, читающих эту статью, это может стать неожиданностью или вызовом для вашего традиционного метода лечения пациентов.

Комментарии доктора Суами об использовании ICG

Я хотел бы воспользоваться моментом, чтобы вернуться к мысли Луизы о том, как меняются пути тела после операции. Когда кому-то предстоит операция, его организм естественным образом регулирует лимфатические сосуды, чтобы найти новые пути, по которым жидкость может стекать.

В исследованиях на животных я обнаружил, что когда часть конечности отсутствует или повреждена, организм будет искать новый способ отведения жидкости. По мере того, как организм делает это, он имеет тенденцию полагаться на оставшиеся лимфатические узлы.

По мере того, как организм восстанавливается после операции, он начинает создавать разные пути оттока лимфы. Это может привести к тому, что моя терапия часто не согласуется с тем, что преподают традиционные терапевты по лечению лимфедемы. Однако если подумать, на самом деле это простой подход.Мы просто используем краситель, чтобы отслеживать, где жидкость будет расширяться, а затем следим за этой картой по телу при правильном лечении.

Луиза Кельмейер описывает отображение с помощью ICG

Теперь давайте посмотрим, как на самом деле работает блок ICG и что мы видим на мониторах, когда используем его в наших клиниках. Когда мы используем ICG, мы видим, как жидкость движется по сосудам с помощью зеленого красителя индоцианина на мониторе.

Устройство ICG перемещается по лимфатическим сосудам пациента, и ему помогает ручной лимфодренажный массаж (MLD).Если открытые лимфатические сосуды остаются, мы можем использовать давление кончика пальца — и мы можем видеть жидкость внутри и наблюдать, как она движется, на экране монитора. Пациент тоже может это видеть и может наблюдать за движением во время оценки ICG.

Если мы попадаем в область скопления, это называется обратным током через кожу. Он пытается пройти через нормальный сосуд, но распространяется по лимфатическим сосудам кожи, и ему требуется гораздо большее давление, чтобы пройти через него. Обычно это происходит в более тяжелых или запущенных случаях лимфедемы, когда мы видим большую зону обратного оттока кожи.Это означает, что вам потребуется более сильное давление и более медленная техника массажа.

Итак, мы узнали здесь две вещи. Во-первых, мы определили пути, которые существуют после того, как кому-то была сделана такая процедура, как рассечение подмышечной впадины. Мы традиционно не проводили массаж подмышечной области, потому что полагали, что у них больше нет лимфатических узлов. Но теперь с помощью ICG мы видим, что жидкость пытается пройти через эту область у большинства пациентов, поэтому массаж оправдан.

Еще мы узнали, что каждому человеку с лимфедемой рекомендуется пройти оценку ICG, чтобы мы могли составить индивидуальный план лечения. Конечно, это может быть дорого. В настоящее время нет возможности снизить стоимость для пациента ни в Австралии, ни в США.

Я очень люблю людей, которые не могут позволить себе ICG. Вот почему я иногда пытаюсь помочь пациентам, побуждая их не приходить ко мне на два или три курса лечения, накопить немного денег, чтобы использовать их для оценки ICG, затем получить ICG и продолжить.Это практический способ распределения своих финансовых ресурсов таким образом, чтобы в долгосрочной перспективе они могли максимально помочь им. ICG предоставляет индивидуальный план, поэтому, продвигаясь вперед, мы всегда будем знать, что они получают максимум от своего лечения.

В более широком смысле всем, кто занимается лимфедемой, есть чему поучиться у ICG. Не каждая клиника в мире может позволить себе ICG или иметь специальный набор навыков или подготовку, чтобы иметь такой доступный для использования в своей практике. Однако любой клиницист может извлечь уроки из того, что открывают другие, с помощью ICG и обобщения для своей собственной практики.

Это причина, по которой нам с доктором Суами нравится делиться тем, что мы узнали об ICG, и обучать других. Для нас большая честь использовать ICG каждый день, чтобы помочь нашим пациентам понять свои уникальные возможности своего тела и более эффективно управлять лимфедемой.

Об авторах:

Доктор Хироо Суами, доктор медицинских наук, прошел обучение в Японии в качестве реконструктивного микрохирурга и присоединился к Японскому обществу пластической и реконструктивной хирургии в 1999 году. Он начал свои лимфатические исследования в 2001 году в Исследовательском отделении реконструктивной микрохирургии Мельбурнского университета, Австралия. Доктор Суами разработал новую рентгенографическую технику для демонстрации лимфатической системы и в 2005 году получил премию в области фундаментальной науки от Американского образовательного фонда пластической хирургии. В 2009 году он стал директором исследовательского центра микрохирургии в отделении пластической хирургии MD. Онкологический центр Андерсона в Хьюстоне, штат Техас, где он работал с флуоресцентной лимфографией индоцианинового зеленого в более чем 250 хирургических случаях лимфатического отека.Он присоединился к факультету медицины и медицинских наук Университета Маккуори в 2015 году и продолжает работать с Австралийским отделом лимфатического образования, исследований и лечения (ALERT).

Луиза Кельмейер окончила Сиднейский университет, Австралия, в 1990 году со степенью бакалавра прикладных наук в области профессиональной терапии. С тех пор она накопила почти 30-летний клинический опыт в клинических условиях, специализируясь на реабилитации рака груди и раннем обнаружении, обучении и лечении лимфедемы.Луиза работает аккредитованным терапевтом по лимфедеме и является директором и старшим преподавателем австралийской программы по обучению, исследованию и лечению лимфедемы (ALERT) в Университете Маккуори. Она также является одним из главных исследователей Австралии, работающих в исследовательской группе «PREVENT» Университета Вандербильта, занимающейся ранним выявлением и лечением лимфедемы, связанной с раком груди.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Лечение лимфедемы головы и шеи у онкологических больных Онкологический центр

Брэд Смит и Лейла Литтл — дефектологи.Но их работа немного отличается от того, что вы думаете.

В качестве сертифицированных терапевтов по лечению лимфедемы в секции патологии речи и аудиологии хирургии головы и шеи Смит и Литтл работают с пациентами, чтобы уменьшить лимфедему головы и шеи — отек, который может быть осложнением их лечения рака.

«Это может выглядеть как большой отек, а может и нет, но для наших пациентов он значительный», — говорит Смит, объясняя, что лимфедема в области головы и шеи может иметь разрушительные последствия для самооценки пациента и влиять на основные такие функции, как речь, глотание, зрение или дыхание.

Персонализированное лечение лимфедемы головы и шеи у онкологических больных
Секция патологии речи и аудиологии состоит из группы врачей, которые справляются с рядом лечебных осложнений, многие из которых затрагивают область головы и шеи, и работают над восстановлением качества пациентов жизни.

Одним из осложнений, которые они решают, является лимфедема головы и шеи после лечения, которая может еще больше затруднить выздоровление пациента. Когда значительный отек в области головы и шеи, восстановление основных функций, таких как глотание или разговор, и решение связанных с этим косметических проблем становятся критически важными.

«Раку уделяется такое внимание, что пациенты не замечают диагноза и лечения, чтобы понять результаты, с которыми они столкнутся, и проблемы качества жизни, которые ждут впереди», — говорит Ян С. Левин, доктор философии, профессор кафедры хирургии головы и шеи и заведующий отделением патологии речи и аудиологии. Левин проводит предварительную оценку лечения, чтобы определить, как различные альтернативы лечения, такие как хирургическое вмешательство или лучевая терапия, повлияют на пациентов.

«Мы смотрим, как наши вмешательства повлияют на долгосрочные результаты», — говорит она.«Повар должен уметь пробовать. Проповедник должен уметь говорить».

Первое в своем роде средство для лечения лимфедемы головы и шеи
Хотя лимфедема в области головы и шеи является распространенным осложнением некоторых видов лечения рака, она еще недостаточно изучена и не контролируется.

«Мы первые в стране, кто предлагает лечение лимфедемы головы и шеи логопедами, имеющими сертификаты на проведение этого лечения», — говорит Левин.

Лимфедема головы и шеи возникает, когда организм не может транспортировать жидкость из-за повреждения лимфатической системы.Это происходит, когда рубцы после операции блокируют лимфатические сосуды на шее или лимфатическую систему повреждают лучевой терапией.

Поскольку жидкость нелегко переместить, она редко отступает сама по себе. В ответ Левин и ее коллеги разработали схему лечения лимфедемы головы и шеи, используя метод, сочетающий массаж, компрессионную повязку, методы ухода за кожей и лечебные упражнения.

Смит и Литтл проводят с каждым новым пациентом пару часов, чтобы оценить тяжесть опухоли и ее влияние на другие результаты лечения. Для каждого пациента создаются индивидуально подогнанные компрессионные подушки, которые помогают смягчить жидкость перед выполнением упражнений, направленных на ее перемещение.

Программа лимфедемы головы и шеи включает как амбулаторные, так и домашние терапевтические программы. Пациенты и лица, осуществляющие уход, изучают терапевтические режимы, в том числе легкий массаж и использование специально подобранного компрессионного белья, которое способствует распределению жидкости по непораженным частям тела. Упражнения также можно выполнять в компрессионном белье для повышения эффективности лечения.

«Это не похоже на типичный массаж глубоких мышц», — говорит Смит. «Это комбинация легких круговых движений, которые растягивают кожу и начинают перемещать жидкость в область, которая не была повреждена и может более эффективно стекать».

Значительные улучшения у онкологических больных с лимфедемой головы и шеи
Трехмерные фотографии и измерения делаются в начале и периодически в течение всего лечения для оценки и отслеживания прогресса лечения. По словам Смита, иногда для уменьшения отека требуются месяцы, но некоторые пациенты начинают видеть результаты всего за один сеанс.

«Улучшение часто бывает значительным, — добавляет Левин. «Пациенты выглядят больше, чем они были до лечения рака. Они очень довольны улучшением общего внешнего вида и функциональных возможностей. Это один из видов терапии с несколькими пропущенными визитами».

Более длинная версия этой статьи первоначально была опубликована в Messenger, выпускаемой два раза в месяц публикации MD Anderson для сотрудников.

КТ-диагностика 52 пациентов с лимфомами в лимфатических узлах брюшной полости

Диагностическая ценность КТ для LALN

КТ играет важную роль в диагностике и стадировании лимфом брюшной полости.Основываясь на особенностях КТ LALN, мы классифицировали LALN на одиночный массовый тип, многоузловой тип и диффузный тип.

Одиночный массовый тип LALN включал единичные увеличенные лимфатические узлы и слияние нескольких увеличенных лимфатических узлов (в большинстве случаев). КТ характеризовалась огромной круглой массой или дольчатой ​​массой однородной плотности с равномерным усилением.

Множественные узловые лимфоузлы, наиболее часто встречающиеся, характеризовались увеличенными лимфатическими узлами с региональным распределением. Части увеличенных лимфатических узлов слились вместе и образовали огромную массу.КТ показала поражения однородной плотности с умеренным однородным усилением. Иногда также наблюдалось сосуществование умеренного гомогенного усиления и усиления обода, но полное усиление обода всех поражений наблюдалось редко.

Все образования одиночной массы или множественного узлового типа имели четкие края. Сосуды, такие как брыжеечные сосуды, почечные сосуды, брюшная аорта и нижняя полая вена, могут быть встроены в слитые множественные увеличенные лимфатические узлы, формируя уникальные «сосудистые признаки» [5,6], которые обычно наблюдались при множественных узловых образованиях. тип.«Дуоденальные признаки», названные нами и обнаруженные в множественном узловом типе, могли быть вызваны LALN из-за богатой лимфоидной ткани в горизонтальном сегменте двенадцатиперстной кишки, что отличалось от кишечных лимфом в проявлениях CT. Первый был отмечен сужением кишечной полости, окруженной слиянием множественных мелких узловых поражений с полосатым видом, а второй проявлялся в виде кругового утолщения кишечной стенки и иногда осложнялся растяжением кишечника.Таким образом, «кишечные признаки» имеют важное значение для диагностики ЛАЛН, хотя в предыдущих документах об этом не сообщалось.

КТ-признаки диффузного типа были диффузными, но неконфлюэнтными увеличенными лимфатическими узлами в брыжеечной и забрюшинной области с однородной плотностью и видом булыжника, названные «признаками булыжника». Это имеет важное значение для диагностики диффузного типа ЛАЛ, поскольку не наблюдалось при других заболеваниях. Кроме того, часто вовлекались забрюшинные лимфатические узлы ниже уровня поясничных 2-3 позвонков (HD 94%, NHL 89% соответственно), что имеет большое значение в дифференциальной диагностике туберкулезных лимфатических узлов [1,6].

Приведенная выше классификация проявлений КТ на 3 типа в LALN может не только помочь в рентгенологической диагностике LALN, но и направлять клиническое ведение LALN, например сфера лучевой терапии.

LALN часто ассоциируется с абдоминальными экстраузловыми лимфомами, и около 54% ​​пациентов имели поражение желудочно-кишечного тракта [4]. Это важно для диагностики ЛАЛ, особенно лимфом желудочно-кишечного тракта, которые имеют высокую заболеваемость и показывают характерное круговое утолщение стенки желудочно-кишечного тракта с заметным растяжением кишечной полости на КТ.Более половины пациентов в этой серии были связаны с лимфомами желудочно-кишечного тракта. Кроме того, связь с другими лимфомами твердых органов, такими как печень и селезенка, также полезна для диагностики. Брюшина и сальник редко поражаются LALN [7-11]. В этой серии было 2 случая, и КТ показала большое количество асцита и сальников.

Результаты КТ HD отличаются от результатов НХЛ. Согласно литературным данным и этому отчету [6,14], мы суммируем различия следующим образом: увеличенные лимфатические узлы HD редко встречаются в брыжейке, менее 5% [14], 8.3% в этой статье, с небольшим количеством мелких поражений, распределенных рассредоточенно. Слияние увеличенных лимфатических узлов HD наблюдается редко (16,7%), что в основном встречается при множественном узловом типе (60%). НХЛ имеет широкое распространение, включая все участки лимфатических узлов брюшной полости, при этом часто поражается брыжейка (45%). Слияние увеличенных лимфатических узлов является обычным (60%), проявляя признаки заложенности сосудов, признаки заложенности кишечника и признаки булыжника. НХЛ наблюдается не только в многоузловом типе (60%), но также почти во всех диффузном типе и одиночном типе (22.5%, 17,5% соответственно).

КТ-проявления LALN до радиохимиотерапии отличаются от проявлений LALN после лечения [22], включая уменьшение размеров поражений и изменения характеристик внутренних узлов. КТ-характеристики ЛАЛ после лечения характеризуются уменьшением количества увеличенных лимфатических узлов и уменьшением очагов поражения. Хотя большинство увеличенных лимфатических узлов остаются однородной по плотности на КТ, очевидное увеличение неоднородности или усиление краев поражений может происходить из-за внутриузлового некроза после лечения, а в отдельных случаях может наблюдаться кальцификация поражений [5]. Результаты этой серии показали, что 20% поражений исчезли после радиохимиотерапии, и большинство из них произошло по многоузловому типу с относительной концентрацией увеличенных лимфатических узлов. Таким образом, компьютерная томография имеет важное значение для оценки терапевтической эффективности радиохимиотерапии и помогает при выборе следующего лечения.

Дифференциальный диагноз LALN

Туберкулез лимфатических узлов: Туберкулез лимфатических узлов можно легко спутать с лимфомами, и на него следует обратить особое внимание.Поражения туберкулеза лимфатических узлов относительно концентрированы (негематогенный диссеминированный тип), и обычно поражаются брыжеечные лимфатические узлы. КТ показывает периферическое или многокомпонентное увеличение увеличенных лимфатических узлов, а иногда и внутриузловые кальцификации. Это заболевание часто связано с туберкулезным перитонитом, который имеет характерные признаки сальниковой корки, нечеткие признаки брыжейки и асцит высокой плотности. LALN относительно рассредоточен, и мезентериальные лимфатические узлы обычно не вовлечены в HD.КТ показывает однородное увеличение лимфатических узлов с меньшим количеством кальцификатов (только 0,84%) в нелеченых случаях [12–13], а перитонеальный и сальниковый лимфоматоз выявляется нечасто. Кроме того, усиление краев увеличенных лимфатических узлов при ЛАЛ (в том числе до и после радиохимиотерапии) на КТ отличается от такового при туберкулезе лимфатических узлов. Поражения LALN с четкими краями и мультилокулярным усилением обнаруживаются нечасто.

Метастатическая опухоль: Возникновение метастазов в брюшные лимфатические узлы обычно следует за развитием первичной опухоли.Увеличенные лимфатические узлы расположены рядом с первичным поражением, демонстрируя неоднородное или увеличенное ободок из-за некроза лимфатических узлов с частым возникновением асцита. Ни туберкулезные лимфатические узлы, ни метастатическая лимфаденопатия не имеют признаков наличия кровеносных сосудов, кишечных признаков или признаков булыжника.

Таким образом, LALN имеет три типа проявлений CT, и каждый из них имеет некоторые уникальные особенности, ценные для качественной диагностики LALN. КТ также полезна для патологической классификации LALN и терапевтической оценки при последующем наблюдении.

Relish играет динамическую роль в нише, модулируя гомеостаз предшественников крови дрозофилы в процессе развития и инфицирования

[Примечание редакции: авторы повторно представили исправленную версию статьи на рассмотрение. Ниже приводится ответ авторов на первый раунд проверки.]

Существенные изменения:

Рецензент № 1:

Это исследование сначала описывает новую роль Relish в развитии крови и его связь с передачей сигналов экдизона, а также с врожденным иммунитетом.Исследование интересное, хорошо продуманное, а показанный механизм достаточно нов, чтобы заслужить публикацию в журнале.

Большое спасибо за ваши комментарии. Мы рады отметить, что наши усилия были оценены по достоинству.

Но последняя часть, где описывается биологическое значение Rel в PSC, довольно слаба по сравнению с другими генетическими взаимодействиями и требует дополнительных оценок или лучшего описания.

Спасибо за ваш вклад. Мы рассмотрели все опасения, связанные с биологическим значением Rel в гематопоэтической нише / PSC.Все эксперименты, предложенные с вашей стороны, были выполнены, чтобы добавить силы этой части нашей рукописи. Большое спасибо за обогащение нашего исследования.

1. Хотя авторы сосредотачиваются на экспрессии Relish в PSC, Relish также экспрессируется в предшественниках, как показано на Рисунках 1C-D и Рисунках 2 — дополнении 1A-E. В связи с этим потеря Rel в PSC, по-видимому, ослабляет Rel как в медуллярной зоне, так и в PSC (рис. 1D). Согласовано ли выражение Relish в обеих зонах? Приводит ли Rel РНКи к сходным фенотипам, когда управляется предшественниками? Показана ли функция Rel автономной по отношению к ячейке?

а.Потеря экспрессии Relish в клетках-предшественниках MZ происходит из-за резкого уменьшения их количества. Следовательно, потеря экспрессии Rel в MZ происходит не на клетку, а из-за меньшего количества клеток-предшественников.

б и д. Чтобы проверить, являются ли экспрессия и функция Relish в нише и медуллярной зоне взаимно независимыми, мы проверили интенсивность экспрессии белка Relish в нишах и предшественниках как контрольных, так и лимфатических узлов Rel RNAi. Количественный анализ выявил более чем 2-кратное снижение экспрессии Relish в нишах Rel RNAi по сравнению с контролем, тогда как специфическая экспрессия предшественников осталась неизменной (см. Рис. 1 C-E).Само вышеприведенное наблюдение указывает на то, что функция Rel, описанная в нашем исследовании, является клеточно-автономной.

г. Функция Rel внутри предков полностью независима от одной из ниш. Это часть продолжающегося исследования в лаборатории и выходит за рамки текущей рукописи.

2. По сравнению с генетическими оценками, параграфы, описывающие онтогенетическую и иммунологическую значимость Relish, довольно слабые и завышенные. Единственная генетическая основа взаимодействия Relish и экдизона — это экспрессия UAS – EcR_DN.Спасает ли UAS-relish фенотипы EcR_DN? Если экдизон действительно модулирует уровень вкуса, есть ли какие-либо колебания уровня вкуса в ПСХ во время личиночного развития?

Спасибо, что подняли этот вопрос. В текущую версию рукописи включены эти недостающие фрагменты информации.

После специфической для ниши сверхэкспрессии Relish в сочетании с потерей EcR мы обнаружили спасение в пролиферации ниш (рис. 6 QU) и дефектах дифференцировки (рис. 6, приложение 2A-E), которые в противном случае связаны с потерей EcR (рис. 6 IL. и МП).Они также упоминаются в строке основного текста: 407-413.

Что касается экспрессии Rel, мы исследовали белок Rel в двух разных временных точках, 60 и 72 часа AEH, что соответствует гребню и минимуму экдизона соответственно. Мы не видим существенной разницы в уровне, отражающем колебания. Мы думаем, что базальный уровень экдизона, присутствующий на всех личиночных стадиях (Hodgetts et al., 1976; Kraminsky et al., 1980, Handler, 1982, Riddiford, L.M., 1994), достаточен для поддержания экспрессии Rel в нише.См. Ответ автора image1A-C ниже.

A-C: Не наблюдалось значительного изменения экспрессии Relish в нише через 72 часа (AEH) (B-B ‘) по сравнению с 60 часами (AEH) (A-A’).

Статистический анализ данных из A-B ‘(n = 29 P-значение = 0,297; двусторонний t-критерий Стьюдента).

Как ось Rel – TAK1 – JNK – Wg или Hh изменяется в соответствии с уровнем экдизона во время нормального развития? Повышается или понижается регуляция Relish и его нижележащих путей в ПСХ при дополнительном введении экдизона?

Наше исследование показывает, что во время развития опосредованная экдизоном экспрессия Relish подавляет активность JNK в нише.Следовательно, в отсутствие Rel происходит эктопическая активация передачи сигналов JNK (Рисунок 5A-C). Таким образом, можно предположить, что экзогенная поставка экдизона увеличит уровень вкуса в нише, усиливая тормозную руку на передачу сигналов JNK . Основываясь на существующей литературе (Karim et al., 1991, A.J Andres A.J и Thummel C.S, 1994), мы инкубировали лимфатические железы в 20E (5 мкм). В этих экспериментах ex vivo постоянно наблюдалось небольшое увеличение экспрессии Rel по сравнению с имитацией лечения (см. Ниже, фиг. 2 A-D).В соответствии с нашим результатом, активация JNK в нише не была замечена даже в этом сценарии. Это наблюдение далее

подтвердил наше заявление о том, что выражение Rel может предотвратить активацию JNK (см. Изображение ответа автора 2E-F).

A-C ‘: после инкубации 20E наблюдалось небольшое увеличение экспрессии Relish по сравнению (B-C’) с имитацией инкубированных образцов (A-A ‘).

D. Статистический анализ данных из A-B ‘(n = 24 P-значение = 6,19 x 10-7; двусторонний t-критерий Стьюдента). E-F. Экспрессия JNK оставалась неизменной в образцах, инкубированных с 20E (F) и имитация (E) инкубирования.

3. Что касается № 2, авторы предположили, что протеасомная деградация (фактор X) подавляет Relish во время бактериальной инфекции. Подтвердили ли авторы, что другие компоненты пути заражения? Или это уже известно? Достаточна ли избыточная экспрессия UAS-Relish_WT, чтобы блокировать преждевременную дифференцировку лимфатических клеток при инфекции? Меняется ли уровень экдизона при заражении? Не показывая прямых доказательств, строки 475–489 следует перенести в обсуждение, а результаты приглушить.

В неинфицированном сценарии сверхэкспрессия Relish в нише уменьшала количество нишевых клеток и дифференцировку предшественников (рисунок 1, рисунок, дополнение 1F-H, и рисунок 6, рисунок, приложение 2C и E). Однако во время заражения Relish деградирует даже при сверхэкспрессии по сравнению с фиктивным (рис. 7H-H ‘). Таким образом, мы можем сделать вывод, что посттранскрипционная регуляция влияет на стабильность Relish во время инфекции.

На основе общей экспрессии EcR (подтвержденный репортер активности экдизона, Hogness DS et al., 1993, Segraves WA et al., 1999, Matunis EL et al., 2014), очевидно, что уровень передачи сигналов экдизона остается неизменным во время инфекции. Однако последующая потеря экспрессии Relish указывает на регуляцию, вызванную во время инфекции, чтобы преодолеть влияние развития (см. Изображение ответа автора 3A-C).

A-B: Не наблюдалось значительного изменения экспрессии EcR в нише при инфицировании и имитации.

C. Статистический анализ данных из A-B (n = 12 P-значение = 0,364).

Рецензент № 2:

В этой рукописи авторы исследуют роль Relish в лимфатических узлах дрозофилы (LG). Они установили, что вкус экспрессируется в клетках PSC и что снижение его экспрессии в этих клетках (путем экспрессии РНКи вкуса с драйвером PSC-gal4) приводит к увеличению PSC, усилению дифференцировки плазматоцитов, не влияет на количество кристаллических клеток и уменьшает количество клеток-предшественников в костномозговая зона (МЗ).В PSC Relish контролирует уровни Wingless, которые, в свою очередь, контролируют пролиферацию клеток PSC и, следовательно, размер PSC. Это исследование также устанавливает, что подавление удовольствия в PSC приводит к увеличению уровней нескольких актин-связывающих белков, снижению образования филоподий в клетках PSC и снижению высвобождения Hh (HhExt) из PSC. Кроме того, нокдаун в PSC приводит к активации пути JNK в PSC. Эксперименты с эпистазом устанавливают, что JNK действует ниже по течению от Relish, чтобы контролировать образование филоподий и HhExt.В нормальных условиях уровни удовольствия в ПСХ находятся под контролем экдизона. Наконец, в ответ на инфекцию E. coli наблюдается снижение уровней Relish в PSC вместе с повышенной дифференцировкой плазматоцитов.

Это важное исследование, описывающее еще неизвестную регуляцию гематопоэза LG Drosophila.

Большое спасибо за ваши комментарии и признательность. Мы рады отметить, что смогли передать вам наши выводы.

Однако у меня есть некоторые опасения по поводу текущей версии рукописи.

Во введении: авторы не заявляют, что роль PSC в LG в нормальных условиях является предметом споров, и статьи по этому поводу, даже если они расходятся с догмой, должны быть процитированы. В литературе установлено, что предшественники MZ гетерогенны; эта информация должна быть представлена ​​вместе с соответствующими документами.

Мы включили соответствующие ссылки во вводную часть.

В разделе «Результаты» меня в первую очередь беспокоят модели, предложенные на рисунке 7: многие эксперименты по эпистазу отсутствуют, и поэтому на данном этапе анализа невозможно предложить такую ​​модель (см. Комментарии ниже).

Спасибо за ваш вклад. Просим вас ознакомиться с текущей рукописью, которая предоставляет необходимый генетический и эпистатический анализ, чтобы установить ось Ecdysone-Rel- JNK в нише. (Строка №: 401-413 и рисунок 6Q-U, рисунок 6, дополнение к рисунку 2A-E и рисунок 6, дополнение к рисунку 2K-L »).

Кроме того, отсутствуют некоторые элементы управления (изображения и количественные данные) (см. Ниже).

Отметим, что во всех случаях проводились контроли и их количественное определение.Из-за нехватки места мы не включили все элементы управления и их количественное определение в предыдущую версию. Однако, согласно вашему предложению в пересмотренной версии, весь контроль и количественное определение были включены в основную или дополнительные панели.

Вторая проблема касается взаимосвязи между подавлением аппетита в ПСХ, отсутствием филоподий и уменьшением HhExt. Это важные и новые данные, которые следует приводить в основных рисунках. Однако их необходимо объединить (см. Комментарии ниже).

Спасибо за ваш вклад. Теперь мы переместили эти цифры на главную панель (подробности приведены ниже). В соответствии с рекомендациями, мы включили надлежащее количественное определение Hh ^Extra и филоподий (количество и длина). Мы искренне благодарим рецензента за этот вклад, так как результат еще больше укрепил нашу претензию.

Третий момент относится к роли Relish в PSC в ответ на бактериальную инфекцию. В текущей версии рукописи представленные данные являются слишком предварительными, чтобы доказать, что Relish необходим, и предложить, как он участвует в контроле стрессового гематопоэза LG.

На основании предложений обоих рецензентов мы усилили этот раздел нашей рукописи. Пожалуйста, посмотрите ответ ниже.

Рисунок 1: В контексте PSC> rel RNAi последствия для предшественников крови должны быть проанализированы более подробно. от бассейна МЗ. Систематический анализ маркеров MZ (и количественная оценка) должен выполняться во всех проанализированных генетических контекстах (другие рисунки см. Ниже).Дополнительные маркеры для клеток MZ, отличные от Ci, должны быть протестированы, поскольку Ci является частью пути передачи сигналов Hh, который нарушается в этом контексте. Почему индекс кристаллической клетки не изменяется в контексте PSC> rel RNAi? Есть ли дифференцировка ламеллоцитов?

Что касается маркеров MZ, мы теперь включили иммуноокрашивание DE-Cad / Shotgun (Shg) с последующей его количественной оценкой (рис. 1H-I ‘и J). Что касается количества кристаллических ячеек, за исключением нескольких выбросов, в количестве нет значительных изменений.Дифференциация ламеллоцитов не наблюдалась в сценарии потери Rel (βPS, рисунок 1, приложение к рисунку 1I-J ‘). Таким образом, эктопическая дифференцировка, наблюдаемая при потере Rel из ниши, смещена в сторону судьбы плазматоцитов.

Рисунок 3: Как насчет вклада PSC Wg в контроль гомеостаза LG? Как насчет гомеостаза LG (MZ и дифференцированные клетки крови) в условиях, когда размер PSC сохраняется (то есть: PSC> rel RNAi, Wgts)? На Рисунке 3 D – G отсутствует контрольный Wgts (изображение и количественная оценка).

а. Sinenko et al., 2010 показали, что подавление передачи сигналов Wg (за счет сверхэкспрессии Fz2DN) из ниши вызывает уменьшение пула предшественников. В соответствии с этим открытием, наш результат (с использованием UAS-wg-RNAi, а также термочувствительного аллеля wg) показывает снижение числа предшественников (Shg, рис. 3I-M) и усиление дифференциации (P1, рис. 1Б-Е).

г. Прекращение передачи сигналов wingless в сочетании с подавлением Rel из ниши спасает гиперпролиферативную нишу, но не преждевременную дифференцировку предшественников (Рисунок 3, рисунок, дополнение 1G-J, L-P и Q-U).Поскольку поддержание предшественников также зависит от передачи сигналов Hh из ниши, на которую в основном влияет потеря Rel, это является причиной неудач в поддержании предшественников (рис. 3I-M и рис. 3, приложение 1L-P).

г. Мы включили изображение и количественный анализ (рис. 3E-E ‘и H).

Рис. 3B – B ‘: Почему окрашивание Wg сильнее в клетках PSC, которые экспрессируют более низкие уровни GFP?

Все клетки ниши не экспрессируют одинаковые уровни белка Wingless.

Рисунок 3 sup1 E: Существует ли значительная разница в количестве клеток PSC между antp> wgRNAi и контрольными LG? Это должно быть указано. На рис. 3 sup 1 F – I: А как насчет дифференцировки кристаллических клеток и предшественников MZ в PSC> wgRNAi и PSC> WgRNAi, relRNAi?

Наблюдалось значительное снижение пролиферации нишевых клеток в wg ^ts (рис. 3E-E ‘и H), в то время как AntpGal4> UASwgRNAi было почти сопоставимо с контролем (рис. 3, приложение 1 I и K).Однако при коэкспрессии с UAS-RelRNAi число ниш значительно восстанавливается (фиг. 3G-G ‘и H). Интересно, что подавление функции wg в генетическом фоне потери Rel не может спасти эктопическую дифференцировку предшественников (Shg, рисунок 3, приложение к рисунку 1O и P, рисунок 3, рисунок, приложение 1T и U). Количество предшественников, отражаемое Shg в этом генотипе, меньше по сравнению с контролем.

При потере wg из ниши наблюдалось небольшое уменьшение индекса кристаллической ячейки; однако в сочетании с потерей Rel из ниши не наблюдалось существенной разницы с контролем (см. изображение ответа автора 4).

А-Д.

Незначительное снижение индекса кристаллических клеток наблюдалось в wg-РНКи (C) по сравнению с контролем (C), тогда как не наблюдалось значительных изменений в Rel RNAi (KK) (B) и Rel RNAi (KK), wg RNAi (D). E. Статистический анализ данных из A-D (n = 11 P-значение = 3,4×10-2 для контроля по сравнению с wg-РНКи).

Контроль i.е. PSC> wg RNAi (как изображения, так и количественная оценка) отсутствует. Есть ли разница в размерах LG в этом контексте, как ранее сообщалось Sinenko et al., 09?

Потеря функции wg через wg ^ts , мы действительно обнаруживаем значительное уменьшение размера лимфатической железы по сравнению с контролем (см. Изображение ответа автора 5). Обратите внимание, что мы использовали термочувствительный аллель wg, тогда как Sinenko et al. Имели подавленную функцию wg за счет сверхэкспрессии Dfz2DN из PSC.

Значительное уменьшение площади LG наблюдалось у wgts по сравнению с контролем (n = 10, P-value = 2.

3×10-4 двухсторонний t-критерий учащихся).

Рис. 4: Есть ли дефекты LG, когда уровни связывающих актин белков (F actin, singed, ..) изменяются в PSC? Есть ли функциональная взаимосвязь между уровнями Relish и актин-связывающего белка в ПСХ?

При специфической для ниши подавлении Diaphanous (актинполимеразы) наблюдается значительное увеличение дифференцировки по сравнению с контролем (рис. 4, приложение 1A-B ‘и C).

Основываясь на наших генетических данных, мы хотели бы сделать вывод, что ремоделирование актина, наблюдаемое при потере Rel, зависит от JNK .

Рисунок 4 A – B: Экспрессируется ли Hh в подмножестве клеток CZ? Имеется ли базальная экспрессия Hh также в MZ (см. A ‘и B «)?

CZ-специфическая экспрессия Hh отображается в подмножестве кристаллических клеток, так как она колокализуется с пастилкой (подтвержденным маркером для кристаллической клетки). Базальный уровень — это внеклеточный Hh, диффундирующий из источника (ниши) и воспринимаемый его рецептором, запятнанным в клетках MZ.

Кристаллические клетки, отмеченные Lz> GFP, также экспрессируют Hh (красный).

Рисунок 4 sup1 A – E: Данные относительно образования филоподий и HhExt должны быть приведены на основных рисунках, поскольку они являются важными результатами. Однако их еще нужно консолидировать. Необходимы количественные оценки HhExt (количество, дисперсия) и филоподий (количество и размер).

Спасибо за ваши предложения. Мы понимаем вашу точку зрения. Сделали необходимые включения. См. Основной текст: Строка № 254-271.

Мы также предоставили анализ интенсивности Hh ^Ext , рис. 4F, и количественный анализ количества и длины филоподий в текущей версии (рис. 4J-K).

Изображения A – A «: всегда ли HhExt, как показано с кометоподобным рисунком за пределами PSC, наблюдается в элементах управления, или он специфичен для этого изображения?

Извините за созданную путаницу.Кометоподобный узор создается из-за включения нескольких стеков. Теперь мы обработали несколько конфокальных стеков одного и того же изображения, чтобы получить лучшее представление. Посмотрите на новый рисунок (рис. 4 D-D ») в исправленной рукописи. Для справки, старый и новый показаны ниже.

Изображения C – C ‘: Это проблема: показанные ячейки отсоединяются от PSC и мигрируют. В таких условиях имеется больше цитоплазматических расширений, которые отражают миграционный статус клеток.Следовательно, это неправильная иллюстрация филоподий клеток ПСХ.

Мы хотим обратить внимание рецензента на тот факт, что визуализация была сделана на живых тканях, чтобы сохранить и задокументировать динамические и хрупкие филоподиальные расширения. Как только мы помещаем покровное стекло в живые условия, создаваемое давление имеет тенденцию отделять клетки ниши друг от друга в контрольных лимфатических узлах. Тем не менее, нишевые клетки после потери вкуса остаются прикрепленными друг к другу. Это наблюдение можно объяснить нашими результатами, которые демонстрируют, что потеря Rel из клеток ниши увеличивает накопление кортикального актина, заставляя клетки оставаться прикрепленными друг к другу.

изображений F – F » (а также на рис. 4G – L): есть расхождения между изображениями и количественными оценками (6-кратное увеличение контекста PSC> rel RNAi по сравнению с контролем на изображениях не наблюдается).

Мы хотим обратить внимание рецензента на тот факт, что визуализация была сделана на живых тканях, чтобы сохранить и задокументировать динамические и хрупкие филоподиальные расширения. Как только мы помещаем покровное стекло в живые условия, создаваемое давление имеет тенденцию отделять клетки ниши друг от друга в контрольных лимфатических узлах.Тем не менее, нишевые клетки после потери вкуса остаются прикрепленными друг к другу. Это наблюдение можно объяснить нашими результатами, которые демонстрируют, что потеря Rel из клеток ниши увеличивает накопление кортикального актина, заставляя клетки оставаться прикрепленными друг к другу.

Рисунок 5 H – L: отсутствует элемент управления, соответствующий PSC> bskDN (изображения и количественные данные). Рисунок F5 O – Q, элемент управления, tak1 / + (изображения и количественные данные) отсутствует.

В предыдущую версию мы не включали эти изображения из-за нехватки места на соответствующих панелях.В текущей версии мы добавили еще несколько дополнительных фигур, чтобы их можно было разместить на главной панели. В текущей рукописи PSC> bskDN и tak1 / + изображения и количественное определение были включены в рисунок 5 (рисунок 5F-F ‘и H для bskDN и рисунок 5U и W для tak1 / +).

Рисунок 5 L – L ‘, следует заменить (размытое изображение и мигрирующие клетки PSC).

Это эксперимент по спасению, в котором подавление избыточного накопления кортикального актина привело к нормальному поведению нишевых клеток.Пожалуйста, обратитесь к предыдущему ответу по поводу миграции PSC.

Как насчет дифференцировки MZ и кристаллических клеток в этих различных условиях (например: UAS – bskDN, UAS bskDN, Rel RNAi; tak1 / + и tak1, rel RNAi)?

Мы включили статус MZ в эти два генотипа в приложение 2 к рисунку 5. Как видно из рисунков, tak1 (классическая потеря функции) и потеря JNK из ниши оказывает незначительное влияние на предшественника. количество, определенное Shg.

Поскольку потеря Rel из ниши не влияет на индекс кристаллической ячейки, этот аспект не имеет прямого отношения к представленным данным. Однако мы постарались решить эту проблему, учитывая ваше предложение. Результаты, относящиеся к индексу кристаллической ячейки, представлены ниже. И tak1, (классическая потеря функции, изображение ответа автора 7) и потеря bsk (изображение ответа автора 8) из ниши немного уменьшают количество ячеек кристалла.

Незначительное снижение индекса кристаллической ячейки наблюдалось в tak12 (C) и tak12; Rel RNAi (D) по сравнению с контролем (A), тогда как в Rel RNAi (B) значительных изменений не наблюдалось.

E. Статистический анализ данных из A-D (n = 10 P-значение = 1,5 x 10-2 для контроля по сравнению с tak12 и P-значение = 7,4 x 10-2 контроля по сравнению с tak12; Rel RNAi, двусторонний t-критерий Стьюдента).

Незначительное снижение индекса кристаллических клеток наблюдалось в bskDN (C) и bskDN; Rel RNAi (D) по сравнению с контролем (A), тогда как в Rel RNAi (B) значительных изменений не наблюдалось.

E. Статистический анализ данных AD (n = 10 P-значение = 8,5 x 10-2 для контроля по сравнению с bskDN и P-значение = 6.5×10-2 для контроля по сравнению с bskDN; Rel RNAi, двусторонний t-критерий Стьюдента) .

–Эпистаз между путем JNK и Hh, а также между путем JNK и wg должен быть проанализирован. Это необходимо для поддержки моделей, представленных на Рисунке 7.

Мы провели эпистатический анализ для Wingless и JNK .Мы обнаружили подавленную функцию wg в генетическом фоне UAS- hep и нашли спасение в пролиферации ниш (Рисунок 5, рисунок в приложении 1J-N).

Наш более ранний генетический анализ установил, что JNK напрямую влияет на накопление актина в нише (UAShep ^act и эктопическая активация JNK при потере Rel из ниши). В результате повышенная регуляция актина приводит к захвату Hh в нише, тем самым вызывая преждевременную дифференцировку предшественников.

Рис. 6. Демонстрация того, что экдизон контролирует транскрипцию аппетита в PSC, отсутствует. Анализ уровней белка Relish недостаточен, поскольку постпереходная регуляция описана для Relish. Транскрипция relish должна быть проанализирована в PSC> EcRDN LG. Кроме того, необходимы эксперименты с эпистазом, чтобы прочно установить функциональную связь между Relish и экдизоном.

Мы провели спасательные эксперименты, в которых мы чрезмерно экспрессировали Relish в генетическом фоне потери EcR и нашли спасение в пролиферации ниш (Рисунок 6 Q-U) и дефектах дифференцировки (Рисунок 6, приложение 2A-E), связанных с потерей EcR.Кроме того, мы также провели всю монтировку IF вместе с FISH и обнаружили, что это по сравнению с контролем; наблюдается снижение уровня транскриптов Rel, когда EcR подавляется из ниши (рис. 6, приложение 2K-L »).

Спасибо за ваш вклад. Благодаря недавно включенному эпистатическому анализу и результатам двойных антител-FISH, наша рукопись в значительной степени укрепилась.

Рисунок 7: Связь между Relish в PSC и его ролью в гемопоэзе LG в ответ на бактериальную инфекцию еще четко не оценена.То, что увеличение дифференцировки клеток крови происходит в LG в ответ на бактериальную инфекцию, уже было описано (Khadilkar et al;, 2017). Эта ссылка должна быть процитирована в рукописи. Участвует ли индуцированное бактериями снижение Relish в PSC в стрессовом гематопоэзе LG, здесь не установлено, поскольку существует много несоответствий между фенотипами LG у личинок PSC> rel RNAi и в ответ на бактериальную инфекцию и эксперименты по спасению отсутствуют. Хотя в обоих случаях наблюдается увеличение дифференцировки плазматоцитов, нет никакой разницы в размере PSC в ответ на бактериальную инфекцию (что отличается от LG PSC> rel RNAi), и нет разрушения LG у личинок PSC> rel RNAi (что отличается от бактериальной инфекции).Кроме того, нарушение LG в ответ на бактериальную инфекцию — это новые данные, но, к сожалению, они должным образом не задокументированы в этой рукописи. Наконец, в экспериментах с бактериальной инфекцией до сих пор не было описано никаких данных относительно роли пути Hh или JNK в клетках PSC.

Спасибо за ваш вклад. Мы включили ссылки в основной текст текущей версии.

Однако мы не согласны с утверждением, что существуют расхождения в фенотипе данных о потере Rel по сравнению с инфекцией.Обратите внимание на следующие причины:

1. Подобно потере Rel из ниши, передача сигналов JNK вызывается во время инфекции (см. Рисунок 7, приложение 1A-B ‘).

2. В контексте количества клеток в нише лимфатические железы в экспериментах с инфекцией анализировали через 4 часа после инсульта, что является коротким промежутком времени, чтобы ожидать такой же степени пролиферации, как и при нокдауне Rel из ниши. Однако даже в этот короткий период оскорбления мы сталкиваемся со значительным и постоянным увеличением количества нишевых клеток в инфицированных образцах по сравнению с имитацией (рисунок 7, приложение к рисунку 1C-E).

3. В инфицированных образцах мы действительно видим разрушение лимфатических узлов через 4 часа. При потере Rel из ниши мы видим аналогичный ответ в нескольких случаях, когда наблюдается крайняя дифференциация, сопровождаемая отслаиванием LG около 96 AEH (см. Изображение ответа автора 9). Поскольку большинство LG не были повреждены при 96AEH, мы не включили LG с удаленным фенотипом в качестве репрезентативного изображения в текущую рукопись. Однако мы открыты для предложений с вашей стороны и, при необходимости, включим их в текущую версию.

А-Д.

По сравнению с контролем (A) эктопическая дифференцировка и отслаивание лимфатических узлов наблюдались как в инфицированных (B), так и в образцах потери Rel (C).

Является ли транскрипция удовольствия или стабильности белка в ответ на бактериальную инфекцию? На рис. 7 D:> UAS –Rel 68KD, без инфекции, обнаруживается ли белок Relish с помощью иммуноокрашивания в клетках PSC? Это позволило бы прояснить, зависит ли стабильность белка Relish от бактериальной инфекции.

Спасибо за ваше предложение. Antp-GFP> UAS-Rel68KD был способен обогатить выражение Rel в нише (см. Результаты на изображении ответа автора 10). Однако при заражении того же генотипа мы столкнулись с падением экспрессии Rel. См. Рис. 7H-H ‘текущей рукописи. Таким образом, мы можем сделать вывод, что принудительная экспрессия Rel в нише не способна противостоять иммунному вызову. Эти результаты показывают, что стабильность белка находится под угрозой во время заражения